本文選題：甲型肝炎病毒 + 細胞培養(yǎng)�。� 參考：《微生物學(xué)免疫學(xué)進展》2014年04期

【摘要】：目的建立一種細胞培養(yǎng)與實時熒光RT-PCR相結(jié)合的快速檢測甲肝病毒滴度的方法。方法根據(jù)甲肝病毒(HAV)L-A-1株5'端基因組序列,設(shè)計了2條基因特異性引物及一條探針,建立實時熒光RT-PCR法,結(jié)合細胞培養(yǎng)檢測甲肝病毒滴度,并與ELISA檢測法進行比較。結(jié)果實驗中建立的方法能特異檢測甲肝病毒,細胞培養(yǎng)8d檢測病毒滴度為lg107.0CCID50/mL。同一樣本重復(fù)檢測3次,批內(nèi)樣本Ct值的變異系數(shù)最大為0.89%,批間樣本Ct值變異系數(shù)最大為1.66%。建立的細胞培養(yǎng)結(jié)合實時熒光RT-PCR法(細胞培養(yǎng)8 d)與細胞培養(yǎng)ELISA法(細胞培養(yǎng)28 d)檢測甲肝病毒滴度結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論該方法具有快速、靈敏、特異等優(yōu)點,應(yīng)用于疫苗常規(guī)檢測有良好前景。
[Abstract]:Objective to establish a rapid method for the detection of hepatitis A virus titer by cell culture and real-time fluorescent RT-PCR. Methods according to the 5'terminal genome sequence of HAVS-L-A-1 strain, two gene specific primers and a probe were designed, and real-time fluorescent RT-PCR assay was established. The titer of HAV was detected by cell culture and compared with ELISA assay. Results the method established in the experiment can detect hepatitis A virus specifically. The titer of the virus was detected as lg107.0 CCID 50 / mL for 8 days after cell culture. The maximum coefficient of variation of Ct value in the sample was 0.89 and the coefficient of variation of Ct value in the interlot sample was 1.66. There was no significant difference in the titer of hepatitis A virus between cell culture and real-time fluorescence RT-PCR assay (cell culture for 8 days) and cell culture ELISA assay (cell culture for 28 days). Conclusion this method has the advantages of rapidity, sensitivity and specificity, and has a good prospect in routine detection of vaccine.
【作者單位】： 長春生物制品研究所有限責任公司;
【分類號】：R392

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8 朱耀e，

本文編號：1897263