大腦皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)方法的改良及一種體外缺氧缺糖簡易模型的建立
本文選題:SD胎鼠 + 神經(jīng)元 ; 參考:《中南藥學》2014年05期
【摘要】:目的改進SD胎鼠大腦皮層神經(jīng)元體外原代培養(yǎng)方法及其一種缺氧缺糖(OGD)簡易模型建立。方法用溫和的TrypLE胰酶消化得到單個皮層神經(jīng)細胞,用含有B27的Neurobasol培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。培養(yǎng)7 d后,將其培養(yǎng)液換成無糖DMEM培養(yǎng)液,放入缺氧裝置中分別培養(yǎng)4、5及6 h,利用MTT法檢測細胞存活率,并用乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測細胞培養(yǎng)液中LDH的釋放量。結(jié)果分離和培養(yǎng)的神經(jīng)元生長狀態(tài)良好,免疫熒光方法證明該方法培養(yǎng)的大腦皮層神經(jīng)元純度可達到(93.2±1.3)%,能夠達到實驗研究的要求。細胞OGD 4、5及6 h后,細胞存活率分別為(52.7±1.3)%、(26.5±3.3)%及(20.8±1.1)%;LDH的釋放量分別為(52.9±4.8)%、(89.3±1.3)%及(93.2±1.1)%。結(jié)論改良后的培養(yǎng)方法能夠穩(wěn)定地獲得高純度的SD胎鼠大腦皮層神經(jīng)元,用厭氧發(fā)生裝置替代三氣培養(yǎng)箱建立了一種OGD簡易模型,同時選擇OGD 4 h作為缺氧缺糖模型最佳時間點。
[Abstract]:Objective To improve the in vitro primary culture of neurons in cerebral cortex of SD rats and to establish a simple model of hypoxia - deficient glucose ( OGD ) .
【作者單位】: 暨南大學藥學院新藥研究所;
【基金】:國家重大新藥創(chuàng)制-候選藥物研究(No.2012ZX09103101-055) 廣東省醫(yī)學科研基金項目(No.A2013353) 暨南大學科研培育與創(chuàng)新基金項目(No.21611321和No.21613331)
【分類號】:R329.2
【參考文獻】
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