本文選題：實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷 + 膠質(zhì)瘢痕��； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2005年博士論文

【摘要】： 脊髓損傷(spinal cord injury, SCI)后,膠質(zhì)瘢痕(glial scar)的形成是慢性SCI的特征之一,并且是脊髓損傷后神經(jīng)再生障礙的重要原因,脊髓損傷如脊髓挫傷后反應(yīng)性膠質(zhì)化(reactive gliosis),是中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后慢性期的主要病變之一,這種反應(yīng)性膠質(zhì)化,將壞死組織與脊髓隔離,并使前者液化形成囊腔,一方面阻止脊髓的繼發(fā)性損害,另一方面也阻礙了軸突再生。如何在移植治療中判斷切除膠質(zhì)瘢痕的時(shí)機(jī)與范圍,是神經(jīng)外科的難題之一。以往的研究對(duì)膠質(zhì)瘢痕的空間分布特征缺乏研究,目前也無切除膠質(zhì)瘢痕的適宜方法。本研究擬制備打擊傷SCI模型,觀察SCI的影像學(xué)與病理學(xué)表現(xiàn)及大鼠慢性SCI膠質(zhì)瘢痕的時(shí)間與空間分布,希望能發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘢痕分布規(guī)律,為徹底去除膠質(zhì)瘢痕提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。 材料與方法 1.采用犬為脊髓打擊傷模型的損傷能量為30g×15cm,重點(diǎn)對(duì)SCI后組織學(xué)與影像學(xué)變化對(duì)比觀察,觀察SCI影像學(xué)變化的病理基礎(chǔ);采用SD大鼠為脊髓打擊傷模型的損傷能量為30g×5cm,以組織學(xué)、神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分、誘發(fā)電位測(cè)試、免疫組織化學(xué)、免疫熒光組織化學(xué)雙標(biāo)記、BDA順行神經(jīng)纖維示蹤、TMR與HRP逆行神經(jīng)纖維示蹤等方法進(jìn)行觀察,且大鼠所有標(biāo)本均采用恒冷箱矢狀縱行切片,每個(gè)脊髓標(biāo)本切片100張,脊髓全部標(biāo)本10套均進(jìn)行不同染色觀察,每張載玻上每?jī)蓮埱衅g隔200μm,每張切片均能觀察到損傷區(qū)及損傷區(qū)兩端5mm內(nèi)殘留組織,經(jīng)普通光學(xué)微鏡及熒光顯微鏡下觀察并進(jìn)行圖像拼接,觀察損傷區(qū)膠質(zhì)瘢痕分布的形成時(shí)間與空間分布規(guī)律,膠質(zhì)瘢痕厚度及膠質(zhì)瘢痕區(qū)軸突與星形膠質(zhì)細(xì)胞的空間關(guān)系。 2.采用免疫組織化學(xué)染色觀察SCI后神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物nestin與軸突生長(zhǎng)抑制因子nogo在SCI后不同時(shí)間、不同部位的表達(dá)、分布,并分別與NF免疫熒光雙標(biāo)觀察SCI后損傷區(qū)范圍神經(jīng)再生內(nèi)在修復(fù)能力變化規(guī)律,軸突生長(zhǎng)抑制因子nogo在損傷區(qū)分布及其與軸突再生的相互關(guān)系。 3.脊髓損傷大鼠在傷后8周采用BDA順行神經(jīng)纖維示蹤、TMR與HRP逆行神經(jīng)纖維示蹤結(jié)合免疫熒光組織化學(xué)、NF與GFAP熒光雙標(biāo)方法,在矢狀縱切片不同部
[Abstract]:After spinal cord injury, glial scar formation is one of the characteristics of chronic SCI, and it is an important cause of nerve regeneration disorder after spinal cord injury. Spinal cord injury, such as reactive gliosism after spinal cord contusion, is one of the main pathological changes in the chronic stage after central nervous system injury, which separates necrotic tissue from spinal cord and liquefies the former into cystic cavity. On the one hand to prevent secondary damage to the spinal cord, on the other hand also hindered axonal regeneration. How to judge the time and scope of excision of glial scar in transplantation is one of the difficult problems in neurosurgery. Previous research on the spatial distribution of glial scar is lack of research, and there is no suitable method to remove glial scar. The aim of this study was to establish a SCI model of striking injury and to observe the imaging and pathological features of SCI and the temporal and spatial distribution of chronic SCI glial scar in order to find the regularity of glial scar distribution and provide morphological basis for removing glial scar completely. Materials and methods 1. The injury energy of spinal cord injury model in dogs was 30g 脳 15cm. The histopathological basis of SCI was observed by comparing the histological and imaging changes after SCI, and the injury energy of SD rats was 30g 脳 5cm for histology. The neuromotor function score, evoked potential test, immunohistochemistry, immunofluorescence histochemical double labeling, TMR and HRP retrograde nerve fiber tracing were observed. Sagittal longitudinal sections were used in all the specimens of rats. 100 spinal cord sections and 10 spinal cord specimens were observed with different staining. Every two slices on each glass were separated by 200 渭 m, and the residual tissues in the injured area and the two ends of the injured area were observed in each slice. The residual tissues were observed under ordinary optical microscopes and fluorescence microscope, and the images were spliced together. The formation time and spatial distribution of glial scar, the thickness of glial scar and the spatial relationship between axons and astrocytes were observed. 2. Immunohistochemical staining was used to observe the expression and distribution of neural stem cell marker nestin and axon growth inhibitor nogo at different time points after SCI. The changes of nerve regeneration ability and the distribution of axon growth inhibitory factor (nogo) in the injured area after SCI were observed with NF immunofluorescence double labeling, and the relationship between nogo and axon regeneration was also observed. 3. Eight weeks after spinal cord injury, BDA anterograde nerve fiber tracer and HRP retrograde nerve fiber tracing combined with immunofluorescence histochemical staining (NF) and GFAP fluorescence double labeling method were used in the sagittal longitudinal sections of rats.
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R361

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本文編號(hào)：1844183