本文選題：干細(xì)胞 + 臍帶臍血干細(xì)胞��； 參考：《中國組織工程研究》2014年10期

【摘要】：背景:臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞因其具有高度的自我更新和多向分化潛能,以及取材方便等優(yōu)點(diǎn)而日益受到關(guān)注。目的:建立一種改進(jìn)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)方法,并對其生物學(xué)特性進(jìn)行分析。方法:無菌條件下獲取足月妊娠分娩胎兒臍帶,利用改良的組織塊貼壁法分離培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,即將傳統(tǒng)組織貼壁法中本應(yīng)丟棄的組織轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行二次貼壁培養(yǎng),取第3代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行生物學(xué)特性分析。結(jié)果與結(jié)論:組織貼壁后第5-7天可見有梭形細(xì)胞從組織塊邊緣爬出,第10天左右可形成明顯的細(xì)胞克隆。將組織塊轉(zhuǎn)移到新培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),2 d后即可見有細(xì)胞爬出,細(xì)胞生長速度較快,5 d即可形成細(xì)胞克隆。傳代后的細(xì)胞形態(tài)均一,呈成纖維細(xì)胞樣的長梭形。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞高表達(dá)CD90、CD105,不表達(dá)CD34、CD45、HLA-DR。細(xì)胞增殖能力旺盛,平均倍增時(shí)間為50 h左右,41.24%的細(xì)胞處于G2/S期。體外可誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明二次貼壁培養(yǎng)出的細(xì)胞也具有間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性,而且通過這種培養(yǎng)方法獲得的原代間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)是傳統(tǒng)方式培養(yǎng)的2倍。
[Abstract]:Background: umbilical cord derived mesenchymal stem cells (MSCs) have attracted more and more attention due to their high potential for self-renewal, multi-differentiation and easy access to materials. Aim: to establish an improved method for isolation and culture of human umbilical cord mesenchymal stem cells and analyze its biological characteristics. Methods: umbilical cord was obtained under aseptic condition. Umbilical cord mesenchymal stem cells were isolated and cultured by modified tissue mass adherence method. The tissue which should be discarded in the traditional tissue adherence method was transferred to a new culture bottle for secondary adherent culture, and the biological characteristics of the third generation umbilical cord mesenchymal stem cells were analyzed. Results & conclusion: shuttle cells could be seen crawling out from the edge of tissue mass on the 5th to 7th day after tissue adhesion, and obvious cell clones could be formed on the 10th day. After the tissue mass was transferred to the new culture flask for 2 days, it was observed that some cells were crawling out, and the cell clone could be formed at a rapid growth rate of 5 days. After passage, the cells were homogeneous in shape and appeared as long fusiform as fibroblasts. Flow cytometry was used to detect the high expression of CD90, CD105, and no expression of CD34, CD45, HLA-DR. The average doubling time was about 50 h. 41.24% of the cells were in G _ 2 / S phase. Osteoblasts and adipocytes can be induced to differentiate into adipocytes in vitro. The results show that the secondary adherent cells also possess the biological characteristics of mesenchymal stem cells, and the number of primary mesenchymal stem cells obtained by this method is twice as much as that of traditional culture.
【作者單位】： 天津大學(xué)化工學(xué)院制藥工程系系統(tǒng)生物工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;解放軍沈陽軍區(qū)總醫(yī)院;北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射研究所;
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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9 謝姜;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成神經(jīng)干細(xì)胞及其移植治療腦出血的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

10 劉麗輝;獼猴間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合非清髓單倍體造血干細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

2 齊凱;人臍帶來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化初探[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 龐云;人臍帶膠質(zhì)間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與特性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

5 朱華民;兩種細(xì)胞因子組合誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化的研究[D];暨南大學(xué);2010年

6 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

7 周志剛;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成類神經(jīng)元的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2011年

8 陳義;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

9 田毅;人臍帶Wharton's jelly間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性以及其與腦腫瘤干細(xì)胞共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

10 李敏;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞三維載體接種方法的研究[D];蘭州大學(xué);2011年

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本文編號：1840496