白色念珠菌經(jīng)組織蛋白酶B途徑誘導小鼠腹腔巨噬細胞NLRP3炎性體表達
本文選題:白色念珠菌 + 含熱蛋白結構域富含亮氨酸重復序列的核苷酸結合寡聚化結構域; 參考:《新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報》2014年01期
【摘要】:目的探討含熱蛋白結構域3富含亮氨酸重復序列的核苷酸結合寡聚化結構域(NLRP3)在白色念珠菌誘導的小鼠腹腔巨噬細胞促炎性細胞因子產(chǎn)生中的作用及其激活途徑。方法體外培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細胞,將其分為空白對照組、CA-074Me組、白色念珠菌組、白色念珠菌+10-6mol·L-1CA-074Me組和白色念珠菌+10-5mol·L-1CA-074Me組。實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測細胞內(nèi)NLRP3 mRNA表達,Western blot檢測細胞內(nèi)溶酶體組織蛋白酶B(cathepsin B)和胱天蛋白酶-1(caspase-1)p20蛋白質(zhì)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗測定各組細胞培養(yǎng)上清液中白細胞介素-1β(IL-1β)水平。結果白色念珠菌組細胞內(nèi)NLRP3 mRNA表達、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白表達、細胞培養(yǎng)上清液中IL-1β水平均顯著高于空白對照組(P0.01)。加入10-5mol·L-1CA-074Me干預后,細胞內(nèi)NLRP3mRNA表達、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白的表達及細胞培養(yǎng)上清液中IL-1β水平與白色念珠菌組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論白色念珠菌通過活化cathepsin B誘導巨噬細胞NLRP3的表達、caspase-1的活化和IL-1β的分泌。
[Abstract]:Objective to investigate the role of nucleotide binding oligodeoxynucleotides (NLRP3) containing leucine-rich repeats in the production of inflammatory cytokines in mouse peritoneal macrophages induced by Candida albicans. Methods Murine peritoneal macrophages were cultured in vitro and divided into control group (CA-074 me group), Candida albicans group (10-6mol L-1CA-074Me group) and Candida albicans group (10-5mol L-1CA-074Me group). The expression of NLRP3 mRNA in cells was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction. The levels of intracellular lysosomal cathepsin B (B(cathepsin B) and cystatin 1 (caspase-1) p20 protein were detected by Western blot. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to determine the level of interleukin-1 尾-1-1 尾 in the supernatant of cell culture in each group. Results the expression of cathepsin B and caspase-1 p20 protein in the cells of Candida albicans group was significantly higher than that in the control group. The level of IL-1 尾 in the supernatant of cell culture was significantly higher than that in the control group. The expression of cathepsin B and caspase-1 p20 protein in cell culture supernatant and the level of IL-1 尾 in cell culture supernatant were significantly lower than those in Candida albicans group after the intervention of 10-5mol L-1CA-074Me. The difference was statistically significant (P 0.01). Conclusion Candida albicans activated cathepsin B to induce the activation of NLRP3 and the secretion of IL-1 尾 in macrophages.
【作者單位】: 武漢市第一醫(yī)院皮膚科;華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院皮膚科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(編號:81101201,81171495,81271765)
【分類號】:R379
【參考文獻】
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【共引文獻】
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