本文選題：肺炎鏈球菌 + 體內(nèi)誘導(dǎo)基因��； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2005年博士論文

【摘要】：肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)是一種常見(jiàn)的革蘭陽(yáng)性條件致病菌,可引起肺炎、中耳炎、菌血癥、腦膜炎等嚴(yán)重疾病,在全球有很高的發(fā)病率和死亡率。老人、兒童以及艾滋病和先天免疫缺陷的患者是嚴(yán)重 S.pn 感染的高危人群。由于 S.pn 抗生素耐藥率的增加和目前疫苗的缺陷性,使得其感染的后果廣泛、嚴(yán)重。因此要想從根本上解決 S.pn 的防治問(wèn)題,就要深入了解其致病的分子機(jī)制,為研發(fā)新的藥物和疫苗提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 病原菌侵入宿主體內(nèi)后,就進(jìn)入了一個(gè)生存競(jìng)爭(zhēng)的“戰(zhàn)場(chǎng)”,為了自身的生存及應(yīng)對(duì)宿主免疫系統(tǒng)的攻擊它將調(diào)整其基因表達(dá)的模式,下調(diào)一些非必需基因的表達(dá),上調(diào)另一些基因的表達(dá),這些上調(diào)的基因是病原菌在宿主體內(nèi)生存所必需的,它們很可能是致病過(guò)程中的關(guān)鍵基因,稱(chēng)之為體內(nèi)誘導(dǎo)基因(in vivo-induced gene, ivi gene),是潛在的抗生素作用靶點(diǎn)和疫苗候選者。本研究應(yīng)用基于啟動(dòng)子誘捕策略的體內(nèi)表達(dá)技術(shù)(in vivo expression technology,IVET),以肺炎鏈球菌莢膜合成的關(guān)鍵基因 galU 作為體內(nèi)報(bào)告基因,利用其缺陷體不能合成莢膜多糖,從而不能在宿主體內(nèi)存活的特點(diǎn),篩選鑒定肺炎鏈球菌 ivi 基因。研究?jī)?nèi)容包括以下三個(gè)部分: 1、構(gòu)建肺炎鏈球菌莢膜合成的關(guān)鍵基因 galU 缺失的突變體,獲得肺炎鏈球菌莢膜缺陷菌株,并研究其生物學(xué)功能,為后續(xù)肺炎鏈球菌體內(nèi)誘導(dǎo)基因的鑒定提供實(shí)驗(yàn)菌株和技術(shù)平臺(tái)。 采用長(zhǎng)臂同源多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Long flanking homology polymerase chain reaction,LFH-PCR)方法,制備中間為紅霉素耐藥基因(erm),
[Abstract]:Streptococcus pneumoniae S.pn) is a common gram-positive opportunistic pathogen, which can cause severe diseases such as pneumonia, otitis media, bacteremia, meningitis and so on. The elderly, children and people with AIDS and congenital immunodeficiency are at high risk of severe S.pn infection. Because of the increase of antibiotic resistance rate of S.pn and the defect of current vaccine, the result of infection is widespread and serious. Therefore, in order to solve the problem of prevention and cure of S.pn, it is necessary to deeply understand the molecular mechanism of its pathogenesis and provide theoretical and experimental basis for the development of new drugs and vaccines. After invading the host body, the pathogen enters a "battlefield" of survival competition. In order to survive and respond to the attack of the host's immune system, it will adjust its gene expression pattern and down-regulate the expression of some non-essential genes. Upregulate the expression of other genes that are necessary for the pathogen to survive in the host, and that are likely to be key genes in the pathogenesis. Called in vivo-induced gene, ivi gene is a potential antibiotic target and vaccine candidate. In this study, the in vivo expression technique based on promoter trapping strategy was used to study the expression of galU, the key gene of capsule synthesis of Streptococcus pneumoniae, which could not synthesize capsular polysaccharides by using its defective body. The ivi gene of Streptococcus pneumoniae was screened and identified. The research includes the following three parts: 1. To construct the mutant of galU deletion, which is the key gene in the capsule synthesis of Streptococcus pneumoniae, to obtain the strain with deficient capsule of Streptococcus pneumoniae, and to study its biological function. To provide experimental strains and technical platform for identification of induced genes of Streptococcus pneumoniae in vivo. The long arm homologous polymerase chain reaction (long flanking homology polymerase chain reactionn LFH-PCR) was used to prepare erythromycin resistance gene (Erythromycin).
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類(lèi)號(hào)】：R378

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1809861