本文選題：HLA-A~*0201重鏈(Hc或α鏈) + 輕鏈(β2m)��； 參考：《第一軍醫(yī)大學(xué)》2006年博士論文

【摘要】：背景和目的 T細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)最關(guān)鍵的細(xì)胞之一，，研究T細(xì)胞的識別、活化及頻數(shù)分布是現(xiàn)代免疫學(xué)基礎(chǔ)研究及應(yīng)用研究的一個最重要的環(huán)節(jié)。 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocytes，CTL或cytotoxic T cells，Tc)在T細(xì)胞免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，CTL主要識別存在于靶細(xì)胞(如病毒感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞)表面的抗原多肽，這種識別受MHC—Ⅰ類分子的限制。CTL的主要生物學(xué)作用為參與抗病毒免疫、抗腫瘤免疫及移植排斥反應(yīng)。但CTL體外培養(yǎng)比較困難，擴(kuò)增過程帶來大量非抗原表位特異性的T細(xì)胞，缺乏精確分析抗原特異CTL的頻數(shù)以及快速分離擴(kuò)增這類細(xì)胞的技術(shù)。 在單個細(xì)胞水平研究抗原表位特異性T細(xì)胞是非常重要的。在過去，通常用鉻51釋放測定法和有限稀釋分析法來測定抗原特異T細(xì)胞反應(yīng)，但這兩種方法耗時、費工、不敏感，而且不能在單個細(xì)胞水平上研究抗原特異性CTL。自從1996年Altma等發(fā)明了HLA—Ⅰ類肽四聚體的方法后，使得抗原特異CTL的檢測邁向了新的臺階，這個新方法更敏感，可以直接體外在單個細(xì)胞水平分析抗原特異T細(xì)胞，而不需體外擴(kuò)增，這樣對體內(nèi)免疫反應(yīng)提供了更精確的描述。該方法通過基因工程技術(shù)去除了HLA—Ⅰ類分子α鏈的穿膜區(qū)和細(xì)胞質(zhì)尾，把長度為15個氨基酸的BirA酶的底物肽(BSP)加在其的羧基端形成融合蛋白，在體外按一定比例與特異的抗原肽片斷和β2微球蛋白共孵育，形成折疊正確的構(gòu)象，成為MHC肽復(fù)合物，再經(jīng)過純化，把生物素標(biāo)記在底物肽的賴氨酸殘基上，再與標(biāo)記藻藍(lán)蛋白的鏈親和素反應(yīng)，形成一個標(biāo)記藻藍(lán)蛋白的鏈親和素與四個生物素化的MHC肽復(fù)合物結(jié)合的四聚體。MHC肽四聚體通過模擬
[Abstract]:Background and purpose T cell is one of the most important cells in the body's immune system. The study of T cell recognition, activation and frequency distribution is one of the most important links in the basic and applied research of modern immunology. Cytotoxic T lymphocytes (CTL) or cytotoxic T cells (Tc) play an important role in T cell immune response. CTLs mainly recognize antigenic peptides on the surface of target cells (e.g. virus infected cells or tumor cells). This recognition is restricted by MHC- 鈪

本文編號：1799845