本文選題：肉毒梭菌毒素 + A型　； 參考：《軍事醫(yī)學(xué)》2014年03期

【摘要】：目的制備特異性的抗A型肉毒毒素(BoNT/A)的卵黃抗體(IgY)并分析抗體的生物活性。方法人工合成密碼子優(yōu)化BoNT/A重鏈碳端蛋白(AHc)基因片段,并構(gòu)建含有該目的片段的重組表達質(zhì)粒pTIG-Trx-AHc。誘導(dǎo)表達的AHc蛋白經(jīng)純化定量后免疫健康母雞,4次免疫后通過水稀釋和硫酸銨鹽析法從雞蛋中提取特異性IgY。在小鼠模型中測定純化后IgY的中和能力。結(jié)果和結(jié)論 AHc蛋白在大腸桿菌中獲得了可溶性表達,占菌體裂解液上清的20%。純化后的IgY純度較高,效價超過1∶100 000。小鼠體內(nèi)中和實驗證實,IgY可完全中和20LD50A型天然肉毒毒素,在預(yù)防和治療肉毒中毒表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
[Abstract]:Objective to prepare a specific egg yolk antibody against botulinum toxin type A (Bot / A) and analyze its biological activity.Methods the BoNT/A heavy chain carbon terminal protein (BoNT/A) gene fragment was optimized by synthesizing codon and the recombinant expression plasmid pTIG-Trx-AHcwas constructed.The induced expression of AHc protein was purified and quantified and then immunized for 4 times. The specific AHc protein was extracted from eggs by water dilution and ammonium sulfate salting-out method.The neutralization ability of purified IgY was determined in mouse model.Results and conclusion the soluble expression of AHc protein was obtained in Escherichia coli, accounting for 20% of the supernatant of the cell lysate.The purity of purified IgY was higher than 1: 100 000.Neutralization experiments in mice showed that IGY can neutralize 20LD50A type natural botulinum toxin completely and has a good application prospect in prevention and treatment of botulism.
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所;
【基金】：全軍“十二五”重大專項資助項目(AWS11C001)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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【共引文獻】

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1 代U，

本文編號：1766198