本文選題：褪黑素 + 溴氰菊酯�。� 參考：《華中科技大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 擬除蟲菊酯是根據(jù)天然除蟲菊素衍化發(fā)展而來(lái)的一類人工合成農(nóng)藥,具有廣譜、高效、低殘留及在哺乳動(dòng)物體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化迅速的特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、林業(yè)、衛(wèi)生部門的害蟲防治。擬除蟲菊酯根據(jù)有無(wú)α氰基分為兩種類型,溴氰菊酯(Deltamethrin,DM)是一種Ⅱ型擬除蟲菊酯殺蟲劑。DM主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),大鼠中毒癥狀是流涎、亂抓、旋轉(zhuǎn)性抽搐、痙攣直至死亡。目前研究認(rèn)為DM神經(jīng)毒性作用可能的機(jī)制之一是與谷氨酸信號(hào)傳導(dǎo)功能紊亂有關(guān),而谷氨酸NMDA受體拮抗劑MK-801雖然在細(xì)胞水平能一定程度地降低DM的神經(jīng)毒作用,但在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中因其本身對(duì)小鼠具有較強(qiáng)的毒性而不能得以有效地使用。DM神經(jīng)毒性作用可能的機(jī)制之二是DM引起的腦組織氧化損傷,表現(xiàn)為脂質(zhì)過(guò)氧化程度升高,抗氧化酶活性降低。 褪黑素(Melatonin,MT)是松果體腺分泌的生物活性小分子,研究表明MT在阻止氧化性物質(zhì)對(duì)體內(nèi)生物大分子造成的氧化損傷、保護(hù)體內(nèi)抗氧化酶的活力中有著重要的作用。與其他的抗氧化物質(zhì)相比,具有極強(qiáng)的脂溶性和水溶性、能穿過(guò)體內(nèi)多種生理屏障等優(yōu)點(diǎn),在防止神經(jīng)退行性病變帕金森病(PD)、早老性癡呆(AD)、亨廷頓病等疾病方面有很好的應(yīng)用前景。 本研究在DM誘導(dǎo)大鼠腦組織氧化損傷的基礎(chǔ)上,探討MT對(duì)DM所致腦組織氧化損傷的保護(hù)作用以及MT對(duì)DM誘導(dǎo)大鼠腦組織HO-1蛋白表達(dá)的影響,目的是研究褪黑素是否對(duì)DM引起的大鼠腦組織的氧化損傷具有保護(hù)作用及其可能的機(jī)制,為防治溴氰菊酯中毒提供科學(xué)依據(jù)。 第一部分MT對(duì)DM染毒5 d大鼠腦組織氧化損傷的保護(hù)作用 目的:探討MT在DM染毒5 d致大鼠腦組織氧化損傷中的保護(hù)作用。 方法:雄性Wistar大鼠分為5組:橄欖油對(duì)照組、MT對(duì)照組(25.0 mg/kg MT)、DM組(12.5 mg/kg DM)、MT1(25.0 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)組、MT2組(2.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)。連續(xù)5d腹腔注射,在第5 d給藥后4 h斷頭處死各組大鼠,全能酶標(biāo)儀比色測(cè)定大鼠大腦皮層、海馬和小腦組織的丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性。 結(jié)果:(1)與橄欖油對(duì)照組相比,DM組海馬、大腦皮層、小腦MDA含量明顯升高(p 0.01),海馬、大腦皮層的GSH-Px活性明顯降低,小腦CAT活性明顯下降(p 0.05)。(2)與DM組相比,MT1組海馬和大腦皮層MDA含量明顯降低,GSH-Px、CAT和GSH活性明顯升高(p 0.05), SOD活性無(wú)明顯變化(p 0.05)。MT1組小腦MDA含量明顯降低(p 0.05),GSH-Px、CAT和GSH活性有升高的趨勢(shì)但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p 0.05),SOD活性無(wú)明顯變化。(3)與DM組相比,MT2組海馬MDA含量明顯降低,GSH-Px活性明顯升高(p 0.05);MT2組大腦皮層MDA含量明顯降低(p 0.05),GSH-Px、CAT、GSH,SOD活性無(wú)明顯變化。此外,MT1組大腦皮層GSH、GSH-Px活力明顯高于MT2組(p 0.05)。(4)褪黑素對(duì)照組與橄欖油對(duì)照組相比,MDA含量及SOD、CAT、GSH和GSH-Px活性無(wú)明顯差異(p 0.05)。 結(jié)論:DM連續(xù)染毒5 d能誘導(dǎo)大鼠大腦皮層、海馬和小腦MDA含量顯著升高,對(duì)抗氧化酶系統(tǒng)影響在海馬和皮層主要為抑制GSH-Px的活性,對(duì)小腦主要是抑制CAT的活性。褪黑素能明顯降低溴氰菊酯引起的各腦區(qū)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),增強(qiáng)抗氧化酶活性,對(duì)不同腦區(qū)的氧化損傷均有一定的保護(hù)作用。 第二部分MT對(duì)DM染毒10 d大鼠腦組織和血清氧化損傷的保護(hù)作用 目的:研究DM染毒10 d對(duì)大鼠血清氧化損傷的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系及MT保護(hù)作用的時(shí)間-劑量-效應(yīng)關(guān)系,同時(shí)研究DM染毒10 d對(duì)大鼠不同腦區(qū)腦組織的氧化損傷以及MT的保護(hù)作用。 方法:雄性wistar大鼠分為5組:橄欖油對(duì)照組、DM組(12.5 mg/kg DM)、MT1組(7.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)、MT2組(2.5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)、MT3組(0.8mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM),連續(xù)10 d腹腔注射。在給藥的第1 d、第4 d、第7 d對(duì)每組大鼠均進(jìn)行尾尖采血,第10 d給藥4 h后斷頭處死留取血清并分離大腦皮層、海馬和小腦組織。全能酶標(biāo)儀測(cè)定血清和組織中MDA含量以及SOD、CAT、GSH、GSH-Px活性。 結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比,DM組血清中MDA含量第1 d沒(méi)有明顯改變,從第4 d到第10 d,隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)MDA明顯升高(p 0.05);DM組血清中GSH和GSH-Px活性第4 d到第10 d明顯降低(p 0.05),CAT和SOD活性在第7 d和第10 d明顯降低(p 0.05)。與DM組相比,MT1組血清MDA含量從第4 d到第10 d隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)明顯降低(p 0.05),CAT、GSH和GSH-Px活性從第4 d到第10 d逐漸升高(p 0.05),SOD活性在第7 d和第10 d明顯升高(p 0.05)。與DM組相比,MT2組和MT3組血清MDA含量在第7 d和第10 d明顯降低(p 0.05);MT2組血清CAT、GSH-Px活性從第4 d到第10 d逐漸升高(p 0.05),GSH、SOD活性在第7 d和第10 d明顯升高(p 0.05);MT3組血清CAT、GSH、SOD和GSH-Px活性在第7 d和第10 d明顯升高(p 0.05)。(2)與對(duì)照組比較,DM組海馬、皮層、小腦MDA含量明顯升高,分別升高了80.00%、43.35%和39.16%(p 0.01), SOD、GSH、CAT、GSH-Px活性均明顯下降(p 0.05)。(3)與DM組相比,MT1組、MT2組和MT3組海馬、皮層和小腦的MDA含量均明顯降低,SOD、GSH、CAT、GSH-Px活性均明顯升高(p 0.05)。(4)MT3組大腦皮層GSH、GSH-Px活性,海馬CAT、GSH-Px活性和小腦CAT活性明顯低于MT1組(p 0.05)。 結(jié)論:DM染毒10d,血清和腦組織中MDA含量均明顯增加,而抗氧化酶活性均明顯降低,表明DM對(duì)血清和腦組織造成的氧化損傷具有一致性,可通過(guò)檢測(cè)血清中氧化/抗氧化指標(biāo)的變化來(lái)監(jiān)測(cè)腦組織氧化損傷的程度。并且DM對(duì)血清的氧化損傷有時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系,即隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng),脂質(zhì)過(guò)氧化程度越重,抗氧化酶活性越低。而MT能有效改善DM對(duì)血清損傷的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系,并在組織和血清中呈現(xiàn)時(shí)間-劑量-效應(yīng)關(guān)系,即隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng),給予的MT劑量越大,血清和組織中氧化損傷程度越低。 第三部分MT對(duì)DM腦組織HO-1蛋白表達(dá)誘導(dǎo)作用的影響 目的:探討褪黑素在溴氰菊酯對(duì)腦組織HO-1蛋白表達(dá)誘導(dǎo)作用中的機(jī)制。 方法:雄性wistar大鼠分為5組:橄欖油對(duì)照組、DM組(12.5 mg/kg DM)、MT1組(7.5 mg/kg MT+12.5 mg/kg DM)、MT2組(2. 5 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)、MT3組(0.8 mg/kg MT + 12.5 mg/kg DM)。連續(xù)10 d給予相應(yīng)劑量的藥物,在第10 d給藥4 h后,用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大腦皮層、海馬和小腦組織中HO-1蛋白的表達(dá)。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)大腦皮層、海馬中HO-1蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,DM組大腦皮層、海馬和小腦組織HO-1蛋白表達(dá)明顯增多(p 0.01)。與DM組相比,MT1組、MT2組和MT3組大腦皮層、海馬、小腦組織HO-1蛋白表達(dá)明顯降低(p 0.01)。不同劑量的MT組之間相比,MT2組海馬HO-1蛋白表達(dá)明顯高于MT1組(p 0.01),MT3組大腦皮層、海馬和小腦組織HO-1蛋白表達(dá)明顯高于MT1組(p 0.01),MT3組小腦HO-1蛋白表達(dá)明顯高于MT2組(p 0.01)。(2)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,DM組海馬細(xì)胞、皮層細(xì)胞HO-1蛋白表達(dá)明顯升高(p 0.01);與DM組相比,MT1組、MT2組、MT3組海馬細(xì)胞、皮層細(xì)胞HO-1蛋白表達(dá)顯著降低(p 0.01)。 結(jié)論:DM能誘導(dǎo)大鼠大腦皮層、海馬、小腦HO-1蛋白表達(dá)增高,MT則能降低由DM誘導(dǎo)的HO-1表達(dá)的升高。MT對(duì)DM誘導(dǎo)HO-1蛋白表達(dá)的抑制作用呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系,即給予的MT劑量越大,HO-1表達(dá)受抑制的程度越大。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R363;R96

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 曾立愛;褪黑素干預(yù)下丙烯酰胺的一般毒性及神經(jīng)毒性的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：1745578