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不同消化時(shí)間下膠原酶對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-04-12 14:42

  本文選題:膠原酶 + 臍帶; 參考:《中國民族民間醫(yī)藥》2014年24期


【摘要】:目的:比較膠原酶的不同消化時(shí)間,觀察所獲得的間充質(zhì)干細(xì)胞的數(shù)量,確定最為理想的消化時(shí)間。方法:分別采用3h、5h、7h的消化時(shí)間分離臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞;通過傳代進(jìn)行純化和擴(kuò)增培養(yǎng),繪制生長曲線;用流式細(xì)胞儀檢測其表面標(biāo)志。結(jié)果:分離出的間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁后為梭形,呈平行排列生長或漩渦狀生長,并且消化時(shí)間為5h時(shí)收獲到的細(xì)胞數(shù)量最多;流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,獲得的間充質(zhì)干細(xì)胞均表達(dá)CD73、CD105、HLA-ABC,不表達(dá)CD34、CD45、HLA-DR。結(jié)論:膠原酶消化法從人臍帶中分離培養(yǎng)的細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性,并且消化5h收獲得的間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)量最多,生長狀況最好。
[Abstract]:Aim: to compare the different digestion time of collagenase and observe the number of mesenchymal stem cells.Methods: umbilical cord mesenchymal stem cells were isolated by digestion for 3 h or 5 h for 7 h, then purified and cultured by passage, the growth curve was drawn, and the surface markers were detected by flow cytometry.Results: the mesenchymal stem cells were spindle-shaped after adherent to the wall and grew in parallel or whirlpool shape, and the number of cells harvested was the highest when the digestion time was 5 h, and the results of flow cytometry showed that the mesenchymal stem cells grew in parallel or whirlpool shape.All of the obtained mesenchymal stem cells expressed HLA-ABC of CD73, CD105, and did not express HLA-DR of CD34, CD45, or CD45.Conclusion: the cells isolated from human umbilical cord by collagenase digestion have the biological characteristics of mesenchymal stem cells, and the number of mesenchymal stem cells harvested after 5 hours digestion is the largest and the growth condition is the best.
【作者單位】: 協(xié)和干細(xì)胞基因工程有限公司;
【分類號】:R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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