發(fā)布時(shí)間：2018-04-11 06:54

  本文選題：細(xì)粒棘球絳蟲(chóng) + p�。� 參考：《中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)》2014年01期

【摘要】：目的制備細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(Eg)p38蛋白的多克隆抗體,為進(jìn)一步研究Egp38蛋白的功能提供檢測(cè)抗體。方法將Egp38蛋白基因序列克隆至原核表達(dá)載體pET28a,轉(zhuǎn)化E.coli BL21株,IPTG誘導(dǎo)蛋白表達(dá),以Ni親和層析純化Egp38蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA測(cè)定抗體效價(jià),Western blotting檢測(cè)所制備抗體與Eg蟲(chóng)體天然Egp38蛋白的反應(yīng)性。結(jié)果經(jīng)0.2mmol/L IPTG誘導(dǎo),表達(dá)出約46kDa的Egp38重組蛋白,制備獲得效價(jià)在2.56×105以上的多克隆抗體,該抗體能夠與Egp38重組蛋白和Eg蚴蟲(chóng)體內(nèi)的Egp38蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)。結(jié)論成功制備獲得兔抗Egp38多克隆抗體,為研究Egp38在Eg與宿主間的交互作用中的功能和作為藥物靶標(biāo)等研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to prepare the polyclonal antibody against Echinococcus granulosus Echinococcus granulosus Echinococcus granulosus (Echinococcus granulosus) p38 protein and to provide an antibody for further study on the function of Echin@@Methods the Egp38 gene sequence was cloned into prokaryotic expression vector pET28a, and then transformed into E.coli BL21 strain. Egp38 protein was purified by Ni affinity chromatography and immunized rabbits.The antibody titer was determined by Elisa and the reactivity of the prepared antibody to the natural Egp38 protein of the egg worm was detected by Western blotting.Results induced by 0.2mmol/L IPTG, the recombinant Egp38 protein of about 46kDa was expressed, and the polyclonal antibody with titer above 2.56 脳 10 5 was obtained. The antibody could react specifically with the Egp38 protein of Egp38 recombinant protein and Eg cercaria.Conclusion Rabbit polyclonal antibody against Egp38 was successfully prepared, which laid a foundation for the study of the function of Egp38 in the interaction between E.gand and host and as a drug target.
【作者單位】： 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 新疆生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 新疆重大疾病醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;
【基金】：Supported by the National Natural Science Foundation of China(Nos.81000746&81360251)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R392.1

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1734892