本文選題：腦雙位點(diǎn)微透析　切入點(diǎn)：高效液相色譜法　出處：《中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志》2014年01期

【摘要】：目的建立同步動(dòng)態(tài)監(jiān)測清醒自由活動(dòng)狀態(tài)下大鼠腹內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(mPFC)和海馬細(xì)胞外液中乙酰膽堿(ACh)和膽堿(Ch)方法,用于藥物干預(yù)下不同腦區(qū)膽堿類神經(jīng)遞質(zhì)變化研究。方法建立mPFC和海馬雙位點(diǎn)雙通道同步微透析采樣技術(shù)和高效液相色譜-柱后固定化酶反應(yīng)器-電化學(xué)(HPLCIMER-ECD)方法。通過對清醒自由活動(dòng)大鼠mPFC和海馬同步灌流透析取樣,HPLC-IMER-ECD分析藥物作用下大鼠mPFC和海馬細(xì)胞外液中ACh和Ch的動(dòng)態(tài)變化,驗(yàn)證該技術(shù)方法的可行性和適用性。結(jié)果大鼠mPFC和海馬雙套管植入術(shù)及透析采樣后狀態(tài)表現(xiàn)良好,表明腦雙位點(diǎn)雙通道同步微透析采樣技術(shù)可行。HPLC-IMER-ECD法測定ACh和Ch,兩者濃度在0.02~2.00μmo·lL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,ACh最低檢測限為10 nmo·lL-1,Ch最低檢測限為5 nmol·L-1(信噪比為3∶1)。ACh 0.1,0.4和2.0μmol·L-1日內(nèi)精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.87%~1.83%,日間精密度為5.38%~6.80%;Ch日內(nèi)精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.60%~2.91%,日間精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.56%~7.38%;ACh相對回收率為96.0%~113.0%,Ch為102.3%~109.2%。疊氮鈉能明顯降低mPFC和海馬細(xì)胞外液中ACh(P0.05),但能顯著升高兩腦區(qū)內(nèi)Ch含量(P0.05)。人參皂苷Rg1可逆轉(zhuǎn)疊氮鈉導(dǎo)致的海馬區(qū)ACh降低(P0.05)及mPFC和海馬區(qū)Ch含量的升高(P0.05)。mPFC細(xì)胞外液中ACh和Ch較高,受到疊氮鈉影響較海馬區(qū)更敏感。結(jié)論腦雙位點(diǎn)微透析結(jié)合HPLC-IMER-ECD方法能同步監(jiān)測大鼠mPFC和海馬中ACh和Ch含量變化。人參皂苷Rg1可通過調(diào)節(jié)腦內(nèi)ACh和Ch動(dòng)態(tài)平衡,增強(qiáng)中樞膽堿能系統(tǒng)的功能。
[Abstract]:Objective to establish a synchronous and dynamic method for monitoring acetylcholine (ache) and choline choline (Chl) in ventromedial prefrontal cortex (mPFC) and hippocampal extracellular fluid (ECF) of rats under conscious and free activity, and to study the changes of cholinergic neurotransmitters in different brain regions under drug intervention.Methods mPFC and hippocampal double locus two channel simultaneous microdialysis sampling technique and high performance liquid chromatography-post column immobilized enzyme reactor (HPLCIMER-ECD) method were established.The dynamic changes of mPFC and ACh and Ch in rat hippocampal extracellular fluid under the action of HPLC-IMER-ECD were analyzed by mPFC and HPLC-IMER-ECD. The feasibility and applicability of the technique were verified.Results the state of mPFC and hippocampal double cannula implantation and dialysis sampling were good in rats.The results indicate that the dual locus dual channel simultaneous microdialysis sampling technique is feasible. HPLC-IMER-ECD method is suitable for the determination of ACh and Cho. The linear relationship between the two concentrations is good in the range of 0.02 渭 mo lL-1. The minimum detection limit of ach is 10 nmo L -1 Ch minimum detection limit is 5 nmol L -1 (SNR is 3:1).ACh 0.1r 0.4 and 2.0 渭 mol L -1 day).Sodium azide could significantly decrease the contents of mPFC and ache P0. 05 in the extracellular fluid of hippocampus, but significantly increase the Ch content in the two brain regions (P0. 05).Ginsenoside Rg1 could reverse the decrease of ACh in hippocampal area induced by sodium azide (P0.05) and increase the content of mPFC and Ch in hippocampal area. The content of ACh and Ch in extracellular fluid of P0.05U 路mPFC was higher than that in hippocampal area influenced by sodium azide.Conclusion double locus microdialysis combined with HPLC-IMER-ECD can synchronously monitor the changes of ACh and Ch in rat mPFC and hippocampus.Ginsenoside Rg1 can enhance the function of central cholinergic system by regulating the dynamic balance of ACh and Ch in brain.
【作者單位】： 中國中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;國家食品藥品監(jiān)督管理總局保健食品審評中心;
【基金】：中國中醫(yī)科學(xué)院自主選題研究項(xiàng)目(ZZ2010010);中國中醫(yī)科學(xué)院自主選題研究項(xiàng)目(ZZ2013007)~~
【分類號】：R341

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1729873