本文選題：金黃色葡萄球菌　切入點(diǎn)：腸毒素　出處：《中國(guó)病原生物學(xué)雜志》2014年04期

【摘要】：目的從噬菌體隨機(jī)12肽庫中篩選出金黃色葡萄球菌SEC3抑制劑并鑒定其活性。方法用純化的重組的金黃色葡萄球菌SEC3包被酶標(biāo)板,按吸附-洗脫-擴(kuò)增的淘洗過程對(duì)噬菌體隨機(jī)12肽庫進(jìn)行3輪篩選;用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法觀察單個(gè)噬菌體克隆的競(jìng)爭(zhēng)抑制效應(yīng),評(píng)價(jià)其活性。結(jié)果噬菌體3輪篩選的投入產(chǎn)出比逐輪升高,回收率從4.5×10-6升高至6.3×10-4,升高140倍,提示具有良好的富集效果;與陰性對(duì)照(未加噬菌體)相比,隨機(jī)挑選的8個(gè)噬菌體克隆(A1~A8)競(jìng)爭(zhēng)抑制率為10.6%~38.3%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值為9.0~23.5,P0.05),其中A1平均競(jìng)爭(zhēng)抑制率最高,為(30.5±7.4)%,A5的平均競(jìng)爭(zhēng)抑制率最小,為(16.4±4.7)%。以噬菌體滴度對(duì)數(shù)值為x軸,以克隆噬菌體各滴度對(duì)應(yīng)的平均競(jìng)爭(zhēng)抑制率為y軸,繪制競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,其回歸方程為Y=2.7943X-4.7733,相關(guān)系數(shù)r=0.935,決定系數(shù)R2=0.8727。在噬菌體滴度在108~1012pfu范圍內(nèi),隨著噬菌體滴度的增高,其抑制率也增高,且克隆噬菌體滴度在1011pf或1012pfu的競(jìng)爭(zhēng)抑制率最高。結(jié)論用純化的SEC3從噬菌體隨機(jī)12肽庫中篩選的SEC3抑制劑具有一定的競(jìng)爭(zhēng)抑制活性,而且競(jìng)爭(zhēng)抑制活性隨著噬菌體滴度的增高而增強(qiáng)。
[Abstract]:Objective to screen Staphylococcus aureus SEC3 inhibitor from phage random 12 peptide library and to identify its activity.Methods the phage phage random 12 peptide library was screened with purified recombinant Staphylococcus aureus SEC3 coated with enzyme label, and the competitive inhibitory effect of single phage clone was observed by competitive ELISA method, according to the process of adsorption, elution and amplification of phage random 12 peptide library.Its activity was evaluated.Results the input-output of bacteriophage screening increased from 4.5 脳 10 ~ (-6) to 6.3 脳 10 ~ (-4) from 4.5 脳 10 ~ (-6) to 6.3 脳 10 ~ (-4).The logarithm of phage titer was taken as x axis and the average competitive inhibition rate of clone phage titer was y axis. The regression equation was Y _ (2.7943) X-4.7733, the correlation coefficient was 0.935, and the determining coefficient was R _ (2) O _ (2) O _ (0.8727).In the range of 108~1012pfu, the inhibition rate of bacteriophage titer increased with the increase of phage titer, and the competitive inhibition rate of clone phage titer was the highest in 1011pf or 1012pfu.Conclusion the SEC3 inhibitor screened by purified SEC3 from phage random 12 peptide library has a certain competitive inhibitory activity, and the competitive inhibitory activity increases with the increase of phage titer.
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013SK3048) 湖南省衛(wèi)生廳科研基金項(xiàng)目(No.132012024)
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1726318