本文關(guān)鍵詞： 流感病毒 疫苗 甲醛 毛細(xì)管氣相色譜法 -二硝基苯肼 衍生物　出處：《中國(guó)生物制品學(xué)雜志》2014年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的采用衍生毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法應(yīng)用2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine,DNPH)衍生流感病毒裂解疫苗中的游離甲醛,對(duì)其衍生化條件進(jìn)行優(yōu)化后,采用毛細(xì)管氣相色譜法直接進(jìn)樣測(cè)定。色譜條件:色譜柱為HP-5毛細(xì)管色譜柱,初始溫度為150℃,保持1 min,以20℃/min的速率升溫至250℃,保持10 min;檢測(cè)器為電子捕獲檢測(cè)器,溫度為350℃,尾吹60 ml/min;進(jìn)樣口溫度為300℃,隔墊吹掃3 ml/min,分流比50∶1;載氣為氮?dú)?流量為2.5 ml/min;進(jìn)樣量1μl。確定建立的方法的檢測(cè)限和定量限,進(jìn)行線性、專屬性、準(zhǔn)確度、精密度及穩(wěn)定性驗(yàn)證,并用建立的方法檢測(cè)2個(gè)企業(yè)共11批樣品中游離甲醛含量。結(jié)果確定的最佳衍生化條件為:量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各1 ml,分別置15 ml離心管中,加入DNPH鹽酸溶液1 ml,渦旋1 min;超聲5 min;60℃衍生45 min;冰浴冷卻,加入環(huán)己烷2 ml,渦旋萃取1 min;靜置分層,收集上層液1 ml,注入氣相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。該方法的最低檢測(cè)限為0.1μg/ml,定量限為0.2μg/ml,游離甲醛含量在1~30μg/ml范圍內(nèi),與峰面積呈良好的線性關(guān)系(r2=0.999 8);該色譜分離條件對(duì)甲醛的衍生物甲醛2,4-二硝基苯腙有較好的專屬性;3個(gè)不同濃度樣品平均加樣回收率為107%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)為2.11%;對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次的峰面積平均值為40 652.8,RSD為0.004%;甲醛衍生物溶液凍存7 h內(nèi)的峰面積平均值為40 257.35,RSD為1.57%。11批流感病毒裂解疫苗的游離甲醛含量均符合《中國(guó)藥典》三部(2010版)規(guī)定,均不高于50μg/ml。結(jié)論建立了衍生毛細(xì)管氣相色譜法檢測(cè)流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量,該方法操作簡(jiǎn)單,精密度、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度好,專屬性強(qiáng),可用于流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量的測(cè)定。
[Abstract]:Objective to determine and verify the content of free formaldehyde in influenza virus lytic vaccine by derivative capillary gas chromatography. After optimizing the derivatization conditions, the capillary gas chromatography was used to determine the sample directly. The chromatographic conditions were as follows: the chromatographic column was HP-5 capillary column, the initial temperature was 150 鈩，

本文編號(hào)：1516911