本文關(guān)鍵詞： 臍帶血間充質(zhì)干細胞 成骨分化 免疫原性 淋巴細胞　出處：《中國修復(fù)重建外科雜志》2014年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化的人臍帶血間充質(zhì)干細胞(umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)表面免疫分子的表達以及體外調(diào)節(jié)T淋巴細胞增殖反應(yīng)的功能。方法取自愿捐贈的臍靜脈血分離獲取UCB-MSCs,體外擴增至第3代,行成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)2周。流式細胞儀檢測成骨誘導(dǎo)分化前后UCB-MSCs免疫分子人類白細胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ類分子、HLA-Ⅱ類分子的表達。首先以成骨分化的UCB-MSCs刺激異體T淋巴細胞增殖,未誘導(dǎo)的UCB-MSCs設(shè)為對照。共設(shè)立UCB-MSCs 1×102、1×103、1×104和1×105個/孔4種不同細胞密度,分為IFN-γ預(yù)處理組和未處理組。然后以植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激T淋巴細胞增殖,分別加入上述不同數(shù)量級的未誘導(dǎo)與成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs,觀察對T淋巴細胞增殖的影響,并同時加入IL-2檢測對UCB-MSCs抑制T淋巴細胞增殖作用的逆轉(zhuǎn)。最后建立Transwell共培養(yǎng)體系,研究成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs對混合T淋巴細胞反應(yīng)的抑制作用是否為接觸抑制性。結(jié)果未誘導(dǎo)的UCB-MSCs高表達HLA-Ⅰ類分子,不表達HLA-Ⅱ類分子;經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs HLA-Ⅱ類分子的陽性表達率升高。未誘導(dǎo)的UCB-MSCs對異體T淋巴細胞增殖有顯著抑制效果,而成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs對T淋巴細胞增殖的抑制作用明顯減弱(且無細胞數(shù)量依賴性),并且在IFN-γ作用后,有刺激T淋巴細胞增殖的效果。密度為1×104個/孔及1×105個/孔時未誘導(dǎo)的UCB-MSCs可抑制PHA刺激的T淋巴細胞增殖,但加入IL-2后該抑制作用被逆轉(zhuǎn);而成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs則不具有抑制T淋巴細胞增殖的作用。Transwell共培養(yǎng)結(jié)果表明,與直接接觸培養(yǎng)相似,未誘導(dǎo)的UCB-MSCs可顯著抑制T淋巴細胞增殖反應(yīng),而成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs抑制能力明顯減弱。結(jié)論經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs抑制混合T淋巴細胞增殖反應(yīng)的效果明顯低于未經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化的UCB-MSCs,不適合作為骨組織工程或細胞治療的同種異體種子細胞來源。
[Abstract]:Objective to study the osteogenic differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells. Umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells. The expression of immune molecules on UCB-MSCs and the function of regulating T lymphocyte proliferation in vitro. Methods UCB-MSCs was isolated from umbilical vein blood donated by voluntary donors. In vitro amplification to the third generation. Flow cytometry was used to detect the UCB-MSCs immune molecule human leukocyte antigen before and after osteogenic induction. The expression of HLA- 鈪，

本文編號：1463032