本文關(guān)鍵詞：靶向抑制滑膜細(xì)胞TNF-α表達(dá)的siRNA篩選及鑒定　出處：《重慶醫(yī)學(xué)》2014年31期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的設(shè)計并篩選能高效抑制創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞腫瘤壞死因子α(TNF-α)表達(dá)的最佳干擾序列,為進(jìn)一步研究TNF-α基因?qū)?chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。方法根據(jù)人源TNF-αmRNA的序列,設(shè)計合成3組不同的且能干擾TNF-α基因表達(dá)的小型干擾RNA(siRNA)序列,將其轉(zhuǎn)染人創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞,與陰性對照組(NC組)比較。培養(yǎng)48h后,采用實(shí)時災(zāi)光定量PCR(RT-PCR)檢測滑膜細(xì)胞TNF-αmRNA表達(dá)水平,采用ELISA法檢測細(xì)胞上清液TNF-α表達(dá)水平。結(jié)果與NC組相比,3組siRNA中有2組siRNA可有效使人滑膜細(xì)胞中TNF-αmRNA表達(dá)減少(P0.01);同時細(xì)胞上清液中TNF-α分泌量下降,與NC組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論成功設(shè)計合成了特異且高效阻斷TNF-α表達(dá)的siRNA。
[Abstract]:Objective to design and screening could effectively inhibit the traumatic arthritis synovial cells of tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) optimal siRNA expression, to lay the foundation for further clinical application of TNF- alpha gene on traumatic arthritis. Methods according to the sequence of human TNF- alpha mRNA, designed and synthesized 3 different groups and small interfering RNA expression interference of TNF- alpha gene (siRNA) sequences were transfected into human traumatic arthritis synovial cells, and the negative control group (group NC). After 48h culture, using real-time fluorescence quantitative PCR (RT-PCR) disaster detection of synovial cells TNF- alpha mRNA expression level was detected by ELISA cell supernatant. Results the expression of TNF- alpha compared with the NC group, 3 in the siRNA group has 2 sets of siRNA can effectively reduce the TNF- mRNA expression in synovial cells (P0.01); at the same time in the supernatant of TNF- secretion decreased, with statistical difference compared with the group NC (P0.01). On the successful design of siRNA., the specific and efficient blocking of TNF- - alpha expression

【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科;
【基金】：江西省自然(青年)科學(xué)基金項(xiàng)目(2010GZY0250)
【分類號】：R346
【正文快照】： 創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎主要是負(fù)重關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后引起的一種后遺癥,即強(qiáng)大暴力使受累關(guān)節(jié)正常組成部及解剖結(jié)構(gòu)受到破壞,引起軟骨變性、破壞及在此基礎(chǔ)上的關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨、滑膜、關(guān)節(jié)囊、周圍肌肉和韌帶等的一系列改變,最后導(dǎo)致受累關(guān)節(jié)疼痛、功能障礙[1-2]。近年來的研究表明,細(xì)胞因

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本文編號：1435690