可誘導(dǎo)心肌特異性表達(dá)IL-22轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立
本文關(guān)鍵詞:可誘導(dǎo)心肌特異性表達(dá)IL-22轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立 出處:《免疫學(xué)雜志》2014年11期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 白介素 α-肌球蛋白重鏈 強力霉素 Tet-on/TRE-Tight誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)
【摘要】:目的建立心肌特異性、高效表達(dá)白介素22的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。方法將TRE-Tight-IL-22轉(zhuǎn)基因載體顯微注射入C57BL/6小鼠受精卵細(xì)胞中,得到含有其中1段轉(zhuǎn)基因載體的轉(zhuǎn)基因小鼠,再將這種轉(zhuǎn)基因小鼠與含有能夠控制TRE-Tight下游基因在心肌特異性表達(dá)的α-MHC-rtA-hGH的轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行交配,獲得同時含有TRE-Tight-IL-22和α-MHC-rtTA-hGH這2段基因的雙陽性子代轉(zhuǎn)基因小鼠。使用強力霉素(Dox)持續(xù)誘導(dǎo)6周齡雙陽性小鼠6周,再用ELISA方法檢測轉(zhuǎn)基因小鼠心肌細(xì)胞中IL-22表達(dá)量。結(jié)果與野生型C57BL/6小鼠比較,經(jīng)過強力霉素誘導(dǎo)的雙陽轉(zhuǎn)基因小鼠心肌細(xì)胞有高表達(dá)量的IL-22(P0.05)。結(jié)論得到了可誘導(dǎo)、高效表達(dá)IL-22的轉(zhuǎn)基因小鼠系,為IL-22與心力衰竭關(guān)系的深入研究和治療提供新的研究思路。
[Abstract]:Objective to establish myocardial specificity. Methods the TRE-Tight-IL-22 transgenic vector was microinjected into the fertilized eggs of C57BL / 6 mice. Transgenic mice containing one of the transgene vectors were obtained. The transgenic mice were mated with 偽 -MHC-rtA-hGH, which could control the expression of TRE-Tight downstream gene in myocardium. Transgenic mice containing both TRE-Tight-IL-22 and 偽 -MHC-rtTA-hGH genes were obtained. Doxycycline (doxycycline) was used. 6-week-old double-positive mice were continuously induced for 6 weeks. The expression of IL-22 in cardiomyocytes of transgenic mice was detected by ELISA method. The results were compared with those of wild-type C57BL / 6 mice. The cardiomyocytes of Shuangyang transgenic mice induced by doxycycline had high expression of IL-22P0.05. conclusion transgenic mice lines with inducible and high expression of IL-22 were obtained. To provide a new approach for the further study and treatment of IL-22 and heart failure.
【作者單位】: 武漢大學(xué)醫(yī)院檢驗科;武漢大學(xué)生命科學(xué)院病毒學(xué)國家重點實驗室;武漢大學(xué)動物實驗中心/ABSL-3
【基金】:“中國博士后科學(xué)基金”第53批面上資助項目(2013M531745) 國家自然科學(xué)基金青年項目(81301428)
【分類號】:R-332;R541.6
【正文快照】: 轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)是將外源基因?qū)氚l(fā)育早期的動物胚胎細(xì)胞或受精卵,隨機的或者定向的插入受體的基因組并與之整合[1]。其中最為常用的是原核顯微注射法[2],這種由Hammer等建立的方法效果可靠,對插入外源基因片段的大小限制小,成為制備轉(zhuǎn)基因動物最主要的方法。Tet-on/TRE-Tight
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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3 亓s,
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