本文關(guān)鍵詞：miRNA-24對(duì)內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)調(diào)節(jié)及血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響　出處：《中國病理生理雜志》2014年08期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： miRNA- 細(xì)胞增殖 一氧化氮合酶 一氧化氮 Sp轉(zhuǎn)錄因子

【摘要】：目的:為進(jìn)一步探討miRNA-24是否參與內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)表達(dá)的調(diào)控及其對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響,本研究構(gòu)建miRNA-24高表達(dá)質(zhì)粒,并用脂質(zhì)體將其導(dǎo)入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),觀察miRNA-24對(duì)eNOS表達(dá)及HUVECs增殖的影響。方法:用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞增殖情況,RT-PCR、免疫組織化學(xué)和Western blotting檢測eNOS與Sp1轉(zhuǎn)錄因子mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與對(duì)照組比較,miRNA-24高表達(dá)組細(xì)胞增殖減慢41.97%(0.47±0.04 vs 0.81±0.03,P0.01),eNOS mRNA降低44.8%(0.48±0.01 vs 0.87±0.03,P0.05),蛋白表達(dá)減少71.92%(0.16±0.06 vs 0.57±0.08,P0.05);同時(shí)Sp1 mRNA降低53.00%(0.45±0.02 vs 0.93±0.01,P0.05),其蛋白質(zhì)表達(dá)量也相應(yīng)減少62.31%(0.13±0.07 vs 0.31±0.09,P0.05)。miRNA-24抑制組中,上述指標(biāo)比對(duì)照組降低,但比miRNA-24高表達(dá)組明顯升高。結(jié)論:miRNA-24高表達(dá)明顯抑制HUVECs的增殖及eNOS的表達(dá);Sp1可能是參與miRNA-24調(diào)控eNOS表達(dá)的重要因素之一。
[Abstract]:Objective: To investigate whether miRNA-24 is involved in endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expression and its effect on the proliferation of vascular endothelial cells, the research on the construction of miRNA-24 high expression plasmid by liposome into the human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), to observe the effect of miRNA-24 on the expression of eNOS and proliferation of HUVECs. Methods: using four methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay to detect cell proliferation, RT-PCR, immunohistochemical detection of eNOS and Sp1 transcription factor mRNA and protein expression of blotting and Western chemical level. Results: compared with the control group, the group of miRNA-24 high expression cell proliferation decreased 41.97% (0.47 + 0.04 vs 0.81 + 0.03, P0.01). ENOS mRNA decreased 44.8% (0.48 + 0.01 vs 0.87 + 0.03, P0.05), decreased expression of 71.92% (0.16 + 0.06 vs 0.57 + 0.08, P0.05); at the same time, Sp1 mRNA was reduced by 53% (0.45 + 0.02 vs 0.93 + 0.01, P0.05), the protein expression. Should be reduced by 62.31% (0.13 + 0.07 vs 0.31 + 0.09, P0.05) in.MiRNA-24 group, the index was lower than the control group, but higher than the high expression of miRNA-24 group increased significantly. Conclusion: high expression of miRNA-24 and eNOS significantly inhibit the proliferation of HUVECs; Sp1 may be one of the important factors involved in the regulation of miRNA-24 eNOS expression.

【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81373403) 廣西自治區(qū)教育廳課題(No.2013YB049)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 微小RNA(miRNA)是長約22 nt的一類高度保守的內(nèi)源性非編碼單鏈小RNA,其通過序列特異性方式調(diào)控mRNA的降解或抑制蛋白質(zhì)翻譯。約有30%人類基因的表達(dá)受到miRNAs的精細(xì)調(diào)控[1]。近年來研究表明,某些miRNAs參與血管內(nèi)皮細(xì)胞分化、增殖與凋亡的過程[2-3];更重要的是,這類miRNAs不

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本文編號(hào)：1401489