本文關(guān)鍵詞：人HDAC1表達(dá)載體的構(gòu)建及其對(duì)ERa和ERβ蛋白水平的調(diào)控　出處：《鄭州大學(xué)》2006年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一。雌激素(estrogen)對(duì)于維持正常乳腺組織的發(fā)育和功能至關(guān)重要，雌激素作用的發(fā)揮需要通過與雌激素受體α和β(ERα和ERβ)的結(jié)合，而ERα和ERβ二者又都可以以很高的活性與各種組蛋白結(jié)合，而組蛋白的乙�；怯绊懠�(xì)胞各種生理功能的最典型的一種方式，它依賴于組蛋白乙酰化酶(HATs)和組蛋白去乙�；�(HDACs)兩類酶。在乳腺細(xì)胞中，ER正是通過募集如HATs和HDACs等轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子，利用它們呈現(xiàn)的各種酶活性來調(diào)控基因的表達(dá)。 目的 本文意在通過構(gòu)建可在真核細(xì)胞中表達(dá)的重組質(zhì)粒pcDNA3-HA-hdacl，，研究組蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和雌激素受體ERα和ERβ在體外的相互結(jié)合作用，以及HDAC1對(duì)ERα和ERβ蛋白水平的影響規(guī)律，從而在一定角度揭示乳腺細(xì)胞的增殖、分化和癌變的過程，為更好地尋找治療癌癥的藥物靶標(biāo)打下基礎(chǔ)。 方法 ①?gòu)陌┘?xì)胞中用TRIzol一步法提取總RNA產(chǎn)物； ②用Promega反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA； ③利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出hdacl基因完整編碼區(qū)序列； ④通過DNA重組技術(shù)構(gòu)建含hdacl片段的真核表達(dá)載體pcDNA3-HA-
[Abstract]:Breast cancer is one of the most common malignant tumors in women. Estrogen estrogen is essential to maintain the development and function of normal breast tissues. Estrogen plays a role in binding to estrogen receptor 偽 and 尾 -ER 偽 and ER 尾, and both ER 偽 and ER 尾 can bind to various histones with high activity. Acetylation of histone is the most typical way to affect various physiological functions of cells. It depends on histone acetylase (HATs) and histone deacetylase (HDACs) in breast cells. ER regulates gene expression by recruiting transcriptional co-regulatory factors such as HATs and HDACs. Purpose The purpose of this study is to construct a recombinant plasmid pcDNA3-HA-hdacl that can be expressed in eukaryotic cells. Study group protein deacetylase 1 (HDAC1) and estrogen receptor ER 偽 and ER 尾 binding in vitro, and the effect of HDAC1 on ER 偽 and ER 尾 protein levels. Thus, the process of proliferation, differentiation and canceration of breast cells was revealed in a certain angle, which laid a foundation for better searching for drug targets for cancer treatment. Method 1Total RNA products were extracted from cancer cells by TRIzol one-step method. (2) reverse transcription synthesis of cDNAusing Promega reverse transcription kit; (3) the complete coding region of hdacl gene was amplified by PCR. Construction of eukaryotic expression vector pcDNA3-HA- containing hdacl fragment by DNA recombination technique
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R737.9;R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1400445