本文關(guān)鍵詞：LPSp增強狂犬病毒抗原免疫效果的實驗研究　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的:研究革蘭陰性非致病菌成團泛菌脂多糖(Pantoea agglomeranslipopolysaccharide,LPSp)作為佐劑對狂犬病毒抗原免疫效果的影響。 方法:1、分組:將純系(Balb/c)小鼠隨機分為6大組(24只/大組),(1)LPSp實驗組(含狂犬病毒蛋白+LPSp);(2)狂犬病毒蛋白對照組;(3)鋁佐劑疫苗對照組(含鋁佐劑的狂犬病疫苗);(4)聯(lián)合佐劑組(含鋁佐劑+LPSp+狂犬病毒蛋白);(5)LPSp佐劑對照組;(6)空白對照組(注射生理鹽水)。每大組又分三小組(8只/小組),即單次免疫組、二次免疫組、四次免疫組;2、免疫方法:單次免疫組在0天免疫一次,二次免疫組在0天、14天各免疫1次,四次免疫組在0天、7天、14天、21天各免疫1次,均經(jīng)背部皮下免疫。3、血清檢測:單次免疫組、二次免疫組、四次免疫組均在第7天、第14天、第21天、第30天、第45天、第60天各通過小鼠眼內(nèi)眥靜脈采血,分離血清置入-80℃保存待測。用ELISA法檢測血清抗狂犬病毒IgG、IgM的滴度,分別比較各組產(chǎn)生抗狂犬病毒抗體滴度的差異,并觀察各組抗狂犬病毒抗體滴度的動態(tài)變化。 結(jié)果:一、各實驗組誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG抗體滴度測定結(jié)果 (一)、LPSp實驗組一次免疫、二次免疫、四次免疫分別在第21天、第21天、第30天誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體滴度均顯著高于鋁佐劑疫苗對照組和狂犬病毒蛋白對照組、空白對照組(P＜0.05)。LPSp實驗組一次免疫、二次免疫誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG抗體滴度分別在14天和21天達高峰;LPSp實驗組四次免疫在第60天仍呈上升趨勢,而鋁佐劑疫苗對照組四次免疫后在45天IgG抗體滴度達高峰,以后隨著時間的延長抗體滴度均逐漸下降。 (二)、聯(lián)合佐劑組與鋁佐劑疫苗對照組一次免疫后的IgG抗體滴度比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),聯(lián)合佐劑組與鋁佐劑疫苗對照組二次免疫、四次免疫后的IgG抗體滴度比較,僅在第14天這個時間段差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),其它時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 二、免疫次數(shù)對誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG抗體的影響結(jié)果: (一)、比較LPSp實驗組、鋁佐劑疫苗組、狂犬病毒蛋白對照組同一時間不同免疫次數(shù)之間抗狂犬病毒IgG抗體滴度,結(jié)果顯示,各大組內(nèi)免疫四次的小鼠產(chǎn)生IgG抗體滴度均顯著高于免疫二次(P＜0.05),免疫二次也顯著高于免疫一次(P＜0.05)。 (二)、LPSp實驗組的兩次免疫在30天以前產(chǎn)生的抗狂犬病毒IgG抗體滴度較鋁佐劑疫苗對照組的四次免疫高,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。四次免疫后LPSp實驗組誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG的滴度在各個時間段均顯著高于五次免疫的鋁佐劑疫苗對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);并且在免疫后第60天仍呈上升趨勢,而五次免疫的鋁佐劑疫苗對照組在第45天IgG的滴度達到高峰,以后逐漸下降。 三、小鼠血清抗狂犬病毒IgM抗體的檢測結(jié)果 LPSp實驗組和聯(lián)合佐劑疫苗組在每一次免疫后第七天IgM抗體滴度分別顯著高于未加LPSp佐劑的狂犬病毒蛋白對照組與鋁佐劑疫苗組對照組。雖然第七天后IgM抗體滴度下降,但再次免疫時又出現(xiàn)以上情況。 結(jié)論: 1.LPSp佐劑有顯著增強小鼠抗狂犬病毒免疫效果的作用:LPSp作為狂犬病毒抗原的佐劑可顯著提高小鼠對狂犬病毒蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生抗狂犬病毒IgG抗體濃度,且可延長抗體的維持時間; 2.LPSp佐劑增強小鼠對狂犬病毒蛋白誘導(dǎo)產(chǎn)生抗狂犬病毒免疫效果優(yōu)于鋁佐劑:LPSp佐劑促進小鼠產(chǎn)生抗狂犬病毒IgM、IgG抗體濃度均顯著高于鋁佐劑,維持時間也顯著長于鋁佐劑,LPSp佐劑狂犬病毒疫苗免疫二次的效果與鋁佐劑狂犬病毒疫苗免疫四次相當(dāng),LPSp佐劑狂犬病毒疫苗免疫四次的效果顯著強于鋁佐劑狂犬病毒疫苗免疫五次的效果。 3.LPSp佐劑與鋁佐劑無協(xié)同促進作用。
[Abstract]:Objective: To study the effect of Pantoea agglomeranslipopolysaccharide (LPSp), a gram-negative non pathogenic fungus, as an adjuvant on rabies virus antigen immune effect.
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