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骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)C2C12和MC3T3-E1的成骨分化與自噬

發(fā)布時(shí)間:2018-01-09 00:14

  本文關(guān)鍵詞:骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)C2C12和MC3T3-E1的成骨分化與自噬 出處:《中國組織工程研究》2014年20期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:背景:一系列研究表明自噬與分化有密切聯(lián)系;骨形態(tài)發(fā)生蛋白2是誘導(dǎo)C2C12、MC3T3-E1成骨分化經(jīng)典途徑,是研究成骨分化過程的理想模型。目的:觀察自噬與骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)細(xì)胞株C2C12、MC3T3-E1成骨分化的關(guān)系。方法:Real-Time PCR檢測MC3T3-E1與C2C12在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(100μg/L)誘導(dǎo)培養(yǎng)3 d后成骨與自噬相關(guān)指標(biāo)變化。堿性磷酸酶染色檢測不同濃度3-甲基腺嘌呤(0,1,5,10 mmol/L)對骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(100μg/L)誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d MC3T3-E1與C2C12成骨指標(biāo)堿性磷酸酶變化,Western Blot檢測C2C12和MC3T3-E1在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(100μg/L)誘導(dǎo)不同時(shí)間點(diǎn)(0,12,24,48,72,96 h)LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與結(jié)論:在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)細(xì)胞株C2C12、MC3T3-E1成骨分化過程中,誘導(dǎo)自噬相關(guān)mRNA與蛋白水平均有增高趨勢,且自噬相關(guān)蛋白LC3水平增高與時(shí)間相關(guān)。同時(shí),抑制自噬成骨分化過程中堿性磷酸酶表達(dá)水平降低。因此,自噬與骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)細(xì)胞株C2C12、MC3T3-E1成骨分化過程有密切關(guān)系。
[Abstract]:Background: a series of studies indicate that autophagy is closely linked with differentiation; bone morphogenetic protein 2 C2C12 induced osteogenic differentiation of MC3T3-E1 classical pathway, is the ideal model to study osteogenic differentiation. Objective: To observe the autophagy and bone morphogenetic protein 2 induced cell lines C2C12, MC3T3-E1 into bone differentiation. Methods: Real-Time PCR detection of MC3T3-E1 and C2C12 in bone morphogenetic protein 2 (100 g/L) after 3 D culture into the changes of bone and autophagy induced by alkaline phosphatase staining. Different concentrations of 3- methyl adenine (0,1,5,10 mmol/L) for the detection of bone morphogenetic protein 2 (100 g/L) 7 d MC3T3-E1 and C2C12 induced bone alkaline index Western Blot phosphatase changes, the detection of C2C12 and MC3T3-E1 in bone morphogenetic protein 2 (100 g/L) induced by different time points (0,12,24,48,72,96 h) the expression level of LC3- I / II protein. Results and conclusion: the occurrence of eggs in bone formation 2 white induced cell line C2C12, MC3T3-E1 in the process of osteogenic differentiation, induction of autophagy related mRNA and protein level were significantly increased, and autophagy related protein LC3 levels increased with time. At the same time, inhibition of autophagy level of alkaline phosphatase decreased expression of bone differentiation. Therefore, autophagy and bone morphogenetic protein 2 induced cell line C2C12 MC3T3-E1, there is a close relationship between the osteogenic differentiation process.

【作者單位】: 同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81171178)~~
【分類號】:R363
【正文快照】: 0引言Introduction細(xì)胞自噬是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程,涉及細(xì)胞器與蛋白質(zhì)向溶酶體或液泡運(yùn)輸過程中亞細(xì)胞膜的重排,細(xì)胞器與蛋白質(zhì)在溶酶體和液泡中降解或循環(huán)[1-4]。自噬既廣泛存在于正常的生理過程中,如清除細(xì)胞廢物、結(jié)構(gòu)重建、生長分化等,同時(shí)還參與多種疾病的病理過程。自噬不僅與

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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