應(yīng)用基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù)的免疫層析法檢測鼠疫耶爾森氏菌
發(fā)布時間:2018-01-08 22:32
本文關(guān)鍵詞:應(yīng)用基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù)的免疫層析法檢測鼠疫耶爾森氏菌 出處:《中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院》2006年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的:利用基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光技術(shù)(Up-Converting Phosphor Technology,UPT)生物傳感器與免疫層析分析方法(immunochromatographic assay,ICA)相結(jié)合的技術(shù)平臺,研制開發(fā)基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料(Up-Converting Phosphor,UCP)為標(biāo)記物的免疫層析試紙條,實現(xiàn)對鼠疫耶爾森氏菌高靈敏度快速地現(xiàn)場檢測,同時為UPT-ICA在多種生物分析中的廣泛應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法:采用400-nm大小的UCP顆粒作為標(biāo)記物,雙抗體夾心法作為反應(yīng)模式來制備免疫層析試紙條;通過UPT生物傳感器對免疫層析試紙條上經(jīng)免疫反應(yīng)而結(jié)合的UCP發(fā)光信號進行掃描檢測,在一定范圍內(nèi)搜索檢測帶信號(V_T)和質(zhì)控帶信號(V_C),并計算得出檢測帶與質(zhì)控帶的信號比值(V_T/V_C),利用此信號比值可以對標(biāo)本中的鼠疫耶爾森氏菌F1抗原、全菌進行定性和定量檢測。 結(jié)果:檢測鼠疫耶爾森氏菌的UPT-ICA試紙條具有較高的特異性,檢測靈敏度為10,,000CFU/ml,并在10~4~10~8CFU/ml濃度范圍內(nèi)具有良好的線性響應(yīng)特性,且與平板活菌計數(shù)法有較好的一致性(r=0.92406,p<0.001),批內(nèi)和批間誤差(CV)<15%。檢測F1抗原的靈敏度為1ng/ml,其線性檢測范圍為1-300ng/ml。 結(jié)論:UPT-ICA系統(tǒng)能快速特異地定性、定量檢測鼠疫耶爾森氏菌F1抗原和全菌,在鼠疫的現(xiàn)場監(jiān)測過程中具有廣闊的應(yīng)用前景。
[Abstract]:Objective : To develop an immunochromatography test strip based on Up - conversion Luminescence Technology ( UPT ) biosensor and immunochromatography assay ( ICA ) , and to develop an immunochromatography test strip based on up - conversion luminescent material ( UPT ) as a marker , which can be used to detect the high sensitivity and rapid field detection . Methods : The immune chromatography test strip was prepared by using the double antibody sandwich method as the marker and the double antibody sandwich method as the marker . The detection band signal ( V _ T ) and the quality control band signal ( V _ C ) were searched through the UPT biosensor , and the signal ratio ( V _ T / V _ C ) of the detection band and the control band was calculated . Results : The detection sensitivity of UPT - ICA test strip was 10 , 000CFU / ml , and good linearity was found in the concentration range of 10 ~ 4 ~ 10 ~ 8 CFU / ml ( r = 0.992 406 , p < 0.001 ) . The sensitivity of test F1 antigen was 1 ng / ml , and the linear detection range was 1 - 300ng / ml . Conclusion : The UPT - ICA system can be used for the rapid and specific qualitative and quantitative detection of the F1 antigen and the whole bacteria of the disease . The UPT - ICA system has a wide application prospect in the field monitoring of plague .
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:R378
【引證文獻】
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1 賈國超;職愛民;宋春美;張靜;李夢琴;張改平;;上轉(zhuǎn)換熒光技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用[J];食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報;2012年06期
相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條
1 王鵬;鼠疫診斷潛在靶點的篩選[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2010年
本文編號:1398973
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