本文關(guān)鍵詞：骨髓基質(zhì)細胞誘導分化為胰島素分泌細胞的初步探討　出處：《第一軍醫(yī)大學》2005年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：【背景】糖尿病是一種慢性使人衰弱且花費昂貴的疾病,它可導致嚴重的并發(fā)癥,包括失明及心臟、腎臟等疾病。目前,全世界大約有2億人在經(jīng)受著糖尿病的折磨,而且發(fā)病人數(shù)到2025年為止,將再增長一倍。糖尿病已經(jīng)成為患者和社會的一個沉重負擔,而且問題日益嚴重,特別是在發(fā)展中國家。通過胰腺或胰島移植治療1型糖尿病(IDDM)及部分2型糖尿病(NIDDM)是一個很有吸引力的方法,但供體來源不足及免疫排斥反應的存在大大限制了其臨床應用。近年來,隨著成體干細胞及多能干細胞等概念的提出,通過干細胞移植治療糖尿病在世界范圍內(nèi)成為一個新的研究熱點。骨髓基質(zhì)細胞(MSCs)是一種存在于骨髓,具有多向分化潛能的非造血細胞,易于分離培養(yǎng)擴增,遺傳背景穩(wěn)定,由于其取材方便、體外擴增能力強、基因轉(zhuǎn)染效率高、轉(zhuǎn)染后穩(wěn)定表達、可自體回輸從而避免了免疫排斥反應,被認為是細胞工程和基因工程理想的種子細胞,而且能克服胚胎干細胞(ESC)所不能解決的倫理學問題。研究表明,在一定條件下,MSCs能分化形成多種組織。 【目的】本實驗通過體外培養(yǎng)MSCs和胰腺基質(zhì)細胞,在二者傳代穩(wěn)定后,以胰腺基質(zhì)細胞培養(yǎng)液誘導培養(yǎng)MSCs,探討一種在體外條件下將MSCs誘導成為胰島素分泌細胞(IPCs)的簡便方法。 【方法】1.取健康成年SD大鼠斷髓處死,75%酒精浸泡5min,無菌條件下取出脛骨、股骨,剪去骨骺端,用D-Hanks液沖出骨髓;密度梯度離心法獲得單個核細胞,以DMEM/F12全培養(yǎng)基(含碳酸氫鈉2.438g/L,胎牛血清100ml/L,青
[Abstract]:[background] Diabetes mellitus is a chronic debilitating and expensive disease that can lead to serious complications, including blindness and heart, kidney and other diseases. About 200 million people worldwide are suffering from diabetes, and the number of cases will double by 2025. Diabetes has become a heavy burden for patients and society. And the problem is increasingly serious, especially in developing countries. The treatment of type 1 diabetes mellitus (IDDM) and partial type 2 diabetes mellitus (NIDDM) through pancreas or islet transplantation is an attractive approach. However, the shortage of donor sources and the existence of immune rejection have greatly limited its clinical application. In recent years, with the development of the concepts of adult stem cells and pluripotent stem cells. Stem cell transplantation has become a new research hotspot in the world. Bone marrow stromal cells (MSCs) are non-hematopoietic cells which exist in bone marrow and have multi-differentiation potential. It is easy to isolate, culture and amplification, stable genetic background, because of its convenient material, in vitro amplification ability, high efficiency of gene transfection, stable expression after transfection, autologous transfusion to avoid immune rejection. It is considered to be an ideal seed cell for cell engineering and genetic engineering, and can overcome the ethical problems that embryonic stem cells cannot solve. MSCs can differentiate into a variety of tissues. [objective] in this experiment, MSCs and pancreatic stromal cells were cultured in vitro and MSCs was induced by pancreatic stromal cell culture medium after stable passage. To explore a simple method for inducing MSCs into insulin-secreting cells in vitro. [methods] 1. Healthy adult SD rats were sacrificed with 75% alcohol for 5 min. Tibia, femur, epiphysis were removed, and bone marrow was washed out with D-Hanks solution. Mononuclear cells were obtained by density gradient centrifugation in DMEM/F12 culture medium (2.438g / L containing sodium bicarbonate, 100ml / L fetal bovine serum, green.
【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R329

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本文編號：1395595