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丙烯酰胺對雄性大鼠生殖毒性的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-01-07 02:08

  本文關(guān)鍵詞:丙烯酰胺對雄性大鼠生殖毒性的研究 出處:《南京農(nóng)業(yè)大學(xué)》2007年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】: 丙烯酰胺(acrylamide,AA)為白色晶體物質(zhì),是一種重要的化工原料,廣泛用于飲水凈化、污水處理、造紙、采礦業(yè)及科研實(shí)驗(yàn)等。丙烯酰胺可經(jīng)皮膚迅速吸收,是一種重要的職業(yè)接觸化合物。此外,丙烯酰胺主要在高碳水化合物、低蛋白質(zhì)的植物性食物加熱(120℃以上)烹調(diào)過程中形成,成為非職業(yè)人群暴露的一個(gè)重要途徑,因而引起廣泛的關(guān)注。人體還可能通過吸煙的途徑接觸丙烯酰胺。丙烯酰胺具有多種毒性,可影響雄性動物生殖和發(fā)育,但其作用機(jī)制目前尚不清楚。以往研究中多采用高劑量急性染毒,而對丙烯酰胺經(jīng)口長期染毒所產(chǎn)生的生殖毒性作用的報(bào)道較少。本研究采用亞慢性毒性試驗(yàn),結(jié)合整體動物研究和體外實(shí)驗(yàn),系統(tǒng)研究了丙烯酰胺對雄性大鼠生殖機(jī)能、脂質(zhì)過氧化水平和睪丸生殖內(nèi)分泌功能的影響,旨在探究丙烯酰胺對雄性生殖及睪丸內(nèi)分泌功能活動產(chǎn)生的影響,為進(jìn)一步研究丙烯酰胺對雄性生殖毒性作用及其機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。 一、丙烯酰胺對雄性大鼠生殖功能的影響 8周齡體重(200±10)g健康雄性SD大鼠40只,,隨機(jī)分成4組,每組10只。灌胃給予丙烯酰胺,劑量為0(對照組)、4、10、18 mg/kg.d,每周染毒6d,共染毒9周。觀察動物一般情況、體重以及臟器系數(shù)的變化。染毒結(jié)束后,測量后肢支撐力,處死大鼠收集睪丸、附睪和血清。測定精子存活率、精子畸形率、睪丸勻漿中堿性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脫氫酶(LDH)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)活性。結(jié)果表明:隨著染毒劑量的增加,各劑量組與對照組比較,后肢展開距離顯著加寬(P<0.01),精子存活率顯著下降(P<0.01)。10 mg/kg.d和18 mg/kg.d劑量組精子畸形率明顯上升(P<0.05)。ACP活性呈下降趨勢,ALP活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢,兩者的活性在18 mg/kg.d劑量組與對照組比較差異顯著(P<0.05)。LDH活性有下降的趨勢,γ-GT活性有上升的趨勢,但兩者各組間比較差異都不顯著(P>0.05)。 二、丙烯酰胺對雄性大鼠脂質(zhì)過氧化水平的影響 染毒結(jié)束后,處死大鼠收集睪丸及其他臟器和血清,測定血清和睪丸勻漿中丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)水平以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。結(jié)果表明:各劑量組與對照組比較,血清中的GSH水平、MDA水平、GSHPx活性和SOD活性,無明顯差異(P>0.05);而睪丸勻漿中GSH水平和SOD活性顯著下降(P<0.01),GSHPx活性也顯著受到抑制(P<0.05),MDA水平無顯著差異(P>0.05)。 三、丙烯酰胺對雄性大鼠睪丸生殖內(nèi)分泌功能的影響 染毒結(jié)束后,測定血清和睪丸勻漿中睪酮(T)及17β-雌二醇(17β-E_2)濃度。分離純化睪丸Leydig細(xì)胞,建立睪丸Leydig細(xì)胞體外原代培養(yǎng)模型。Leydig細(xì)胞培養(yǎng)24h后,通過CCK-8法測定各劑量組Leydig細(xì)胞活性并測定細(xì)胞培養(yǎng)液T濃度。體外丙烯酰胺染毒劑量分為對照(0mmol/L)、0.1、0.75、4、8mmol/L,同樣通過CCK-8法觀察Leydig細(xì)胞活性。結(jié)果表明:各染毒劑量組血清和睪丸勻漿中T顯著下降(P<0.05),17β-E_2水平無明顯差異,Leydig細(xì)胞活性明顯受到抑制(P<0.01),細(xì)胞培養(yǎng)液T濃度顯著降低(P<0.01)。體外丙烯酰胺染毒24h后,Leydig細(xì)胞活性受到顯著抑制(P<0.01)。 以上結(jié)果表明亞慢性丙烯酰胺染毒損傷雄性生育能力,影響生精過程中有關(guān)一些特征酶活性,睪丸是丙烯酰胺毒性作用的重要靶器官,大鼠后肢運(yùn)動協(xié)調(diào)性明顯受到影響;破壞睪丸氧化-抗氧化系統(tǒng)的平衡,誘導(dǎo)雄性大鼠睪丸氧化損傷的增加,脂質(zhì)過氧化可能是丙烯酰胺導(dǎo)致睪丸毒性作用的機(jī)制之一;影響睪丸Leydig細(xì)胞的功能,改變了雄性大鼠體內(nèi)T/E_2分泌水平,干擾了正常的雄性生殖內(nèi)分泌功能。
[Abstract]:acrylamide ( acrylamide ) is an important chemical raw material and is an important chemical raw material widely used in drinking water purification , sewage treatment , paper making , mining and scientific research . Effects of acrylamide and acrylamide on the reproductive function of male rats Twenty - eight weeks of age weight ( 200 鹵 10 ) g healthy male SD rats were randomly divided into 4 groups . Each group was divided into 4 groups , the dosage was 0 ( control group ) , 4 , 10 , 18 mg / kg 路 d , 6 days a week . ACP activity showed a decreasing trend , ALP activity increased first and then declined , the activity of the two groups was 18 mg / kg 路 d , the difference was significant ( P < 0.05 ) . The activity of LDH decreased and the activity of 緯 - GT increased , but there was no significant difference between the two groups ( P > 0.05 ) . Effect of acrylamide on lipid peroxidation level in male rats The activity of glutathione peroxidase ( MDA ) and glutathione peroxidase ( GSH ) and glutathione peroxidase ( GSHPx ) and superoxide dismutase ( SOD ) in serum and testis homogenate were measured . Effects of acrylamide on reproductive endocrine function in male rat testis The concentration of testosterone ( T ) and 17尾 - estradiol ( 17尾 - E _ 2 ) in serum and testis homogenate were determined after the end of exposure . After 24 h incubation , the activity was determined by CCK - 8 method . The results showed that the concentration of T in serum and testis homogenate decreased significantly ( P < 0 . 05 ) and that of 17 尾 - E _ 2 was significantly inhibited ( P < 0 . 01 ) . After 24 h of acrylamide exposure in vitro , the activity of the cells was significantly inhibited ( P < 0.01 ) . The results showed that the male fertility of subchronic acrylamide was affected by the toxicity of acrylamide , the testis was an important target organ of acrylamide toxicity , and the coordination of rat hindlimb movement was significantly affected . The effect of destroying testis oxidation - antioxidant system was one of the mechanisms to induce testicular toxicity in male rats , and the function of the rat testis was affected . The level of T / E _ 2 secretion in male rats was changed , and the normal male reproductive endocrine function was disturbed .

【學(xué)位授予單位】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1390514

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