發(fā)布時(shí)間：2018-01-06 18:49

  本文關(guān)鍵詞：酵母雙雜交RRS篩選系統(tǒng)中輪狀病毒外殼蛋白VP4誘餌載體的構(gòu)建　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 酵母雙雜交系統(tǒng) Ras募集系統(tǒng) 輪狀病毒 VP4蛋白

【摘要】： 酵母雙雜交技術(shù)自創(chuàng)立以來已成為研究蛋白之間相互作用的重要方法。傳統(tǒng)的酵母雙雜交所研究的蛋白間相互作用是在細(xì)胞核內(nèi)完成的,而近年來發(fā)展起來的酵母雙雜交衍生系統(tǒng)---Ras募集系統(tǒng)(RRS),能夠?qū)⒌鞍组g相互作用的研究定位在細(xì)胞膜上,更具備了靈敏度高、假陽性少等突出優(yōu)點(diǎn)。在本研究中,我們利用了一對(duì)已知蛋白之間的相互作用來驗(yàn)證RRS篩選系統(tǒng),以期將此篩選系統(tǒng)更廣泛地運(yùn)用于其他蛋白間相互作用的研究以及相互作用蛋白的釣取。 輪狀病毒(RV)腸炎及其腸道外并發(fā)癥是威脅兒童健康的重要疾病。RV與其宿主細(xì)胞表面受體的結(jié)合是病毒感染的第一必備步驟,因此,明確RV受體性質(zhì),對(duì)該病的預(yù)防和治療有十分重要的意義。現(xiàn)有研究提示,RV外殼蛋白VP4是病毒吸附受體的主要配體蛋白。在本研究中,我們采用RT-PCR法擴(kuò)增RV外殼蛋白VP4編碼基因并將其克隆到Met425-Myc-Ras載體上,構(gòu)建成適合于RRS篩選系統(tǒng)的誘餌質(zhì)粒并排除了誘餌的自激活作用,表明我們可以將該誘餌質(zhì)粒用于RRS篩選系統(tǒng),為進(jìn)一步從敏感細(xì)胞cDNA文庫中釣取RV受體奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The yeast two hybrid technology since its inception it has become an important method to study on the interaction between proteins. The traditional yeast two hybrid of protein interaction is in the nucleus, and the recent development of the yeast two hybrid system derived ---Ras recruitment system (RRS), to study the interaction between protein localization in the cell membrane, with high sensitivity, low false positive advantages. In this study, we use the interaction between two known proteins to verify RRS screening system, by this screening system more widely used in the research on the interaction between other proteins and proteins interacting with fish take.
Rotavirus enteritis (RV) and parenteral complications are important diseases threatening the health of children with.RV and its host cell surface receptor is the first essential step, so the virus infection, RV receptor, has very important significance for the prevention and treatment of the disease. The present study suggests that RV capsid protein VP4 is the main virus receptor ligand protein adsorption. In this study, we used RT-PCR method to amplify the RV gene encoding the capsid protein VP4 and cloned into the Met425-Myc-Ras vector, to construct the bait plasmid suitable for RRS screening system and exclusion of self activation of bait, that we may put the bait plasmid for RRS screening system. For further from the sensitive cell cDNA library from fishing laid the foundation of the RV receptor.

【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R346

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1 王，

本文編號(hào)：1389075