本文關(guān)鍵詞：人偏肺病毒分離、融合蛋白表達(dá)及主要蛋白的免疫信息學(xué)分析　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2006年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】： PARTⅠ人偏肺病毒在中國(guó)大陸的首次分離及其特征 目的:分離新近發(fā)現(xiàn)的兒童呼吸道病毒病原——人偏肺病毒(Human metapneumovirus, hMPV)中國(guó)大陸流行株,并初步闡明其分子流行病學(xué)規(guī)律。 方法:選取重慶醫(yī)科大學(xué)兒童醫(yī)院因呼吸道感染住院的患兒,無(wú)菌采集鼻咽分泌物兩份。一份用直接免疫熒光法檢測(cè)呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A/B、副流感病毒1、2、3型等常見(jiàn)呼吸道病毒病原。另一份標(biāo)本接種Vero-E6細(xì)胞和LLC-MK2細(xì)胞進(jìn)行病毒分離,用含胰酶的病毒生長(zhǎng)培養(yǎng)基維持培養(yǎng)至21天,觀(guān)察細(xì)胞病變(CPE)。出現(xiàn)CPE者,采用RT-PCR擴(kuò)增hMPV N、F基因,F基因擴(kuò)增產(chǎn)物純化后測(cè)序。用Phylip軟件包中的鄰接法與最大節(jié)約法構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹(shù),用Clustal X軟件進(jìn)行F基因序列比對(duì)分析。收集分析hMPV感染患兒的臨床資料。 結(jié)果:收集的86份鼻咽分泌物中,有6份接種Vero-E6和LLC-MK2細(xì)胞后出現(xiàn)CPE,表現(xiàn)為灶性病變、圓縮、顆粒增多,無(wú)明顯合胞病變,逐漸發(fā)展為細(xì)胞脫落、漂浮。用RT-PCR法成功擴(kuò)增出hMPV N、F基因片段,證實(shí)hMPV中國(guó)流行株首次分離成功。遺傳進(jìn)化樹(shù)表明此6株分離株全為A型。序列變異分析提示6株分離株之間,擴(kuò)增F
[Abstract]:The first isolation and characterization of PART 鈪，

本文編號(hào)：1376033