不同年齡人群內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量與增殖、遷移、黏附、分泌功能的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-01-01 11:10
本文關(guān)鍵詞:不同年齡人群內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量與增殖、遷移、黏附、分泌功能的研究 出處:《浙江大學(xué)》2007年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】: 研究目的: 觀察不同年齡人群血液中分離獲得的內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cell EPCs)的形態(tài),探索內(nèi)皮祖細(xì)胞在數(shù)量及功能上的區(qū)別,了解年齡對(duì)細(xì)胞的影響,,為臨床應(yīng)用細(xì)胞及分子水平的治療提供理論基礎(chǔ)。 方法: 選擇健康新生兒的臍靜脈血和健康成年中青年、老年人的外周血各20例,密度梯度離心法從血液中分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,接種在人纖維連接蛋白(h-FBN)包被的培養(yǎng)板,培養(yǎng)4天后更換培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)3天后收集貼壁細(xì)胞進(jìn)行分析。激光共聚焦顯微鏡鑒定FITC-UEA-I和DiI-acLDL雙染色陽(yáng)性細(xì)胞為正在分化的EPCs,流式細(xì)胞儀檢測(cè)其表面標(biāo)志進(jìn)一步鑒定EPCs,倒置熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)。采用MTT比色法和改良的Boyden小室和黏附能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)觀察EPCs的增殖、遷移、黏附能力。用ELISA法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液的細(xì)胞趨化因子基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)的濃度,測(cè)定其分泌功能。 結(jié)果: 臍血、中青年及老年人外周血中EPCs的數(shù)量分別為(203.0±20.7)、(62.5±10.6)、(44.6±9.1)EPCs/視野(×200),比較發(fā)現(xiàn)臍血的EPCs數(shù)量比中青年及老年人明顯增多(組間比較P<0.001),中青年的EPCs數(shù)量比老年人明顯增多(P<0.05);臍血EPCs的增殖、遷移、黏附能力強(qiáng)于中青年及老年人(組間比較P<0.001),中青年EPCs的增殖、遷移能力強(qiáng)于老年人(P<0.05),但黏附能力沒有顯著差異(P>0.05)。臍血、中青年及老年人外周血EPCs分泌SDF-1的濃度分別為(258.65±30.51)、(131.94±20.43)、(125.58±18.50)pg/ml,臍血的分泌能力明顯增強(qiáng)(組間比較P<0.001),中青年的分泌能力亦強(qiáng)于老年人(P<0.05)。 結(jié)論: 隨著年齡的增長(zhǎng),血液中含有的EPCs數(shù)量減少,其增殖、遷移、黏附功能下降,同時(shí)細(xì)胞分泌基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF-1)的能力亦下降。
[Abstract]:The purpose of the study is:
Isolated endothelial progenitor cells were observed in different age groups in the blood (endothelial progenitor cell EPCs) form, explore the difference of endothelial progenitor cells in number and function, to understand the effect of age on the cells of the treatment for the clinical application of the cellular and molecular level to provide a theoretical basis.
Method錛
本文編號(hào):1364249
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