本文關(guān)鍵詞：人噬菌體抗體庫的構(gòu)建及人源性bFGF抗體的篩選　出處：《免疫學(xué)雜志》2006年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的選用含高效價(jià)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)抗體的自身免疫病患者外周血淋巴細(xì)胞為材料,構(gòu)建人噬菌體抗體庫,并從中篩選抗bFGF抗體克隆。方法收集自身免疫病患者外周血,提取淋巴細(xì)胞總RNA后逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA第一鏈,經(jīng)PCR擴(kuò)增重鏈Fd段和輕鏈基因,分別構(gòu)建到噬菌粒載體pComb3中,將重組噬菌粒載體電轉(zhuǎn)化大腸桿菌XL1Blue,以輔助噬菌體VCSM13超感染,構(gòu)建人噬菌體抗體庫。經(jīng)過3輪固相篩選,獲得能結(jié)合bFGF的抗體克隆,并用ELISA進(jìn)行進(jìn)一步鑒定及篩選,獲得具有高親和力的抗bFGF噬菌體抗體克隆。結(jié)果構(gòu)建的人源噬菌體抗體庫庫容為2.5×107,經(jīng)3輪篩選獲得具有bFGF特異性的F
[Abstract]:Objective to construct human phage antibody library from peripheral blood lymphocytes of patients with autoimmune disease containing high titer basic fibroblast growth factor (bFGF) antibody. Methods Peripheral blood samples of patients with autoimmune disease were collected and total RNA of lymphocytes was extracted and reverse transcripted to obtain the first strand of cDNA. The heavy chain FD segment and light chain gene were amplified by PCR and constructed into the bacteriophage vector pComb3 respectively. The recombinant bacteriophage vector was electrotransformed into Escherichia coli XL1Blue. A human phage antibody library was constructed with the aid of phage VCSM13 superinfection. After three rounds of solid phase screening, the antibody clones which could bind to bFGF were obtained and further identified and screened by ELISA. BFGF phage antibody clones with high affinity were obtained. Results the human phage antibody library containing 2.5 脳 107 phage antibody library was constructed, and bFGF specific F was obtained by three rounds of screening.
【作者單位】： 暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心 暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心 暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心 暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心 暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30471607) 教育部科學(xué)技術(shù)項(xiàng)目(105175)資助
【分類號(hào)】：Q782;R392
【正文快照】： 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrowth factor,bFGF)是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族的重要成員之一。研究表明,bFGF能促進(jìn)腫瘤血管的新生、腫瘤細(xì)胞的增殖以及增強(qiáng)腫瘤的耐藥性,因此在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[1,2]。此外,bFGF還參與肝、矽肺等纖維化的形成[3]。在這

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1358996