人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)、鑒定及成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究
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更多相關(guān)文章: 間充質(zhì)干細(xì)胞 臍帶 細(xì)胞培養(yǎng) 成骨分化
【摘要】:目的:研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)的成骨分化及其在成骨誘導(dǎo)過(guò)程中成骨相關(guān)標(biāo)記物的變化情況。方法:通過(guò)原代培養(yǎng)的方法獲得hUCMSCs;通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)獲得的細(xì)胞進(jìn)行鑒定;通過(guò)茜素紅染色和細(xì)胞免疫熒光技術(shù)對(duì)成骨誘導(dǎo)后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定;在成骨誘導(dǎo)過(guò)程中設(shè)立時(shí)間點(diǎn)(0d、7d、14d、21d),對(duì)成骨相關(guān)標(biāo)記物(堿性磷酸酶、骨橋蛋白、Runx2)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:通過(guò)原代培養(yǎng)成功獲得hUCMSCs;流式分析結(jié)果顯示其表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記物;進(jìn)行成骨誘導(dǎo)21d后茜素紅染色陽(yáng)性,免疫熒光染色檢測(cè)胞漿內(nèi)大量表達(dá)骨橋蛋白;堿性磷酸酶活性和骨橋蛋白(mRNA水平)在第7天時(shí)即表現(xiàn)出具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的升高,Runx2(mRNA水平)在第7天時(shí)達(dá)到峰值,隨后下降。結(jié)論:hUCMSCs的成骨分化過(guò)程是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程;體外誘導(dǎo)7d后成骨分化進(jìn)行已經(jīng)全面啟動(dòng);經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)的hUCMSCs比未誘導(dǎo)的細(xì)胞更適合用于骨缺損修復(fù)。
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院口腔頜面外科軍事口腔醫(yī)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81100792)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 來(lái)源于人臍帶血管周圍組織的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)與其他間充質(zhì)干細(xì)胞(如骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等)在生物學(xué)特性上有很多相似之處,在體外培養(yǎng)時(shí)可以向骨、軟骨、神經(jīng)方向分化[1],同時(shí)hUCM-SCs具有來(lái)源豐富、易于獲取、無(wú)倫理學(xué)限
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1304163
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