重組豬IL-2對口蹄疫重組腺病毒免疫增強效果的研究
本文關鍵詞:重組豬IL-2對口蹄疫重組腺病毒免疫增強效果的研究
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【摘要】:目的構建表達豬白細胞介素-2(poIL-2)的重組腺病毒,研究其作為佐劑對口蹄疫重組腺病毒免疫效果的影響。方法將poIL-2基因克隆到腺病毒的穿梭載體中,與腺病毒骨架載體共轉化BJ5183感受態(tài)細胞,獲得的重組病毒質粒通過脂質體轉染HEK-293A細胞,獲得表達poIL-2的重組腺病毒(rAd5poIL-2)。以rAd5poIL-2作為佐劑與表達PMDV VP基因的重組腺病毒(rAd5VP1)聯合免疫小鼠,以單獨免疫rAd5VP1的小鼠作為對照。通過測定淋巴細胞增殖指數、特異性抗體、IL-4和IFN-γ的水平來衡量rAd5poIL-2對rAd5VP1的免疫增強效果。結果經PCR鑒定,成功構建了rAd5poIL-2。MTT與抗體檢測結果顯示,rAd5poIL-2既能增強rAd5VP1誘導小鼠淋巴細胞增殖,又能促進rAd5VP1誘導小鼠特異性抗體的產生,細胞因子檢測結果顯示,rAd5poIL-2能促進rAd5VP1誘導Th1和Th2的分化。結論 rAd5poIL-2可望成為口蹄疫疫苗的候選佐劑。
【作者單位】: 寧夏醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病原生物學與免疫學系;寧夏醫(yī)科大學檢驗學院臨床免疫學檢驗系;南京農業(yè)大學農業(yè)部動物疫病診斷與免疫重點開放實驗室;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(31001064);國家自然科學基金資助項目(81260678) 寧夏自然科學基金資助項目(NZ13060) 寧夏教育廳高等學?茖W研究項目(NGY2012065)
【分類號】:R392
【正文快照】: 對O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth diseasevirus)抗原位點研究表明,VP1蛋白是其主要抗原,含有主要的B細胞表位,誘導保護性體液免疫應答;但VP1蛋白缺乏T細胞表位,不能有效地抵抗病毒攻擊。研究者試圖通過各種細胞因子佐劑刺激T細胞,提高細胞免疫應答[1-2]。Zhang等[3]通過原核系
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