本文關(guān)鍵詞：K562工程細(xì)胞聯(lián)合IL-2擴(kuò)增方案對(duì)人NK細(xì)胞擴(kuò)增和活化的效果

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【摘要】：目的:評(píng)價(jià)新建立的K562工程細(xì)胞聯(lián)合IL-2擴(kuò)增方案對(duì)人NK細(xì)胞擴(kuò)增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和腫瘤患者的外周血PBMC并分離NK細(xì)胞,采用前期構(gòu)建的K562工程細(xì)胞(將IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562細(xì)胞上進(jìn)行跨膜表達(dá)獲取)聯(lián)合IL-2培養(yǎng)方案對(duì)NK細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和活化,以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NK細(xì)胞的擴(kuò)增效果和NK細(xì)胞表面受體表達(dá)水平,CCK-8法檢測(cè)擴(kuò)增后NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷活性和ADCC活性,CCK-8法檢測(cè)在培養(yǎng)方案擴(kuò)增末期加入TKD多肽對(duì)NK細(xì)胞的活化效果。結(jié)果:對(duì)于健康志愿者的NK細(xì)胞,新建立擴(kuò)增培養(yǎng)方案可使NK細(xì)胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK細(xì)胞中活化性受體NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分別提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受體的表達(dá)變化不大;擴(kuò)增后NK細(xì)胞對(duì)白血病細(xì)胞K562、肺癌細(xì)胞A549、肝癌細(xì)胞SMMU-7721和乳腺癌細(xì)胞MCF-7的殺傷活性分別提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性從(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK細(xì)胞的殺傷活性從(86±4)%提高至(96±2)%。對(duì)于腫瘤患者的NK細(xì)胞,新擴(kuò)增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性提高了17%左右。結(jié)論:K562工程細(xì)胞聯(lián)合IL-2擴(kuò)增方案可高效擴(kuò)增NK細(xì)胞,明顯激活其殺傷活性,擴(kuò)增和活化的NK細(xì)胞可滿足臨床治療的需要。
【作者單位】： 西北工業(yè)大學(xué)生命學(xué)院陜西省空間生物實(shí)驗(yàn)?zāi)M技術(shù)重點(diǎn)學(xué)科實(shí)驗(yàn)室;福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院血液科;
【基金】：陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2014JM4171)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： tumor cells by 19%,29%,26%and 28%respectively.In the cell preparations from cancer patients,ex vivo expansioninduce the percentage of NK cells increase to(90.0±8.0)%and the cytotoxicity against K562 cells by 17%.Conclu-sion:Co-culture with engineered K5

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本文編號(hào)：1290418