本文關(guān)鍵詞：親磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6細(xì)胞胰島素分泌水平

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【摘要】：目的:探討親磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默對(duì)小鼠分泌胰島素細(xì)胞MIN6分泌功能的影響。方法:根據(jù)GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列構(gòu)建siRNA表達(dá)載體(pGPU6-PA-PLA1)并轉(zhuǎn)染MIN6,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot篩選有效干擾載體。將獲得的有效干擾載體轉(zhuǎn)染MIN6細(xì)胞48 h后進(jìn)行葡萄糖刺激實(shí)驗(yàn),檢測(cè)其胰島素分泌的變化。結(jié)果:酶切及測(cè)序證實(shí)成功構(gòu)建了4個(gè)靶向PA-PLA1的siRNA表達(dá)載體。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot分析顯示siRNA表達(dá)載體pGPU6-PA-PLA1-1885具有較高的干擾效率,其轉(zhuǎn)染的MIN6細(xì)胞PA-PLA1 mRNA水平降至對(duì)照組的46.3%,PA-PLA1蛋白水平降至對(duì)照組的33.9%,同時(shí)胰島素分泌水平降至對(duì)照組的65.0%(P0.05)。結(jié)論:PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰島素分泌水平。
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院 醫(yī)藥生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室及生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):30860094) 廣西自然科學(xué)基金(編號(hào):2013GXNSFAA019233)
【分類號(hào)】：R3416
【正文快照】： 親磷脂酸磷脂酶A1(phosphatidic acid-preferring phospholipase A1,PA-PLA1)在細(xì)胞內(nèi)水解磷脂酸(phosphatidic acid,PA)的sn-1脂�；蓅n-2-溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)。PA和LPA不僅參與內(nèi)分泌細(xì)胞的分泌過(guò)程[1-2],而且作為細(xì)胞內(nèi)脂類信號(hào)分子參與多種細(xì)胞過(guò)程

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本文編號(hào)：1280037