本文關(guān)鍵詞：pCMV-LC3-Ag85B重組質(zhì)粒DNA疫苗對結(jié)核的免疫保護作用

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【摘要】：目的構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗原基因與微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗結(jié)核分枝桿菌保護效應(yīng)。方法構(gòu)建pCMV-LC3-Ag85B重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染RAW264.7細胞,Western blot法檢測目的蛋白的表達水平。分別以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B質(zhì)粒免疫BALB/c小鼠。末次免疫2周后,Ag85B刺激下培養(yǎng)各組小鼠脾臟淋巴細胞,ELISA檢測IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3個月后,用H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株尾靜脈注射感染小鼠,計數(shù)肺和脾臟結(jié)核分枝桿菌載量。結(jié)果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7細胞的表達水平與質(zhì)粒濃度呈劑量依賴性。與pCMV-Ag85B免疫組相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫組的IL-2、IFN-γ分泌顯著增加,而肺和脾臟內(nèi)結(jié)核分枝桿菌載量降低。結(jié)論 pCMV-LC3-Ag85B可顯著增強Th1型免疫應(yīng)答,并顯示較好的抗結(jié)核分枝桿菌免疫保護效應(yīng)。
【作者單位】： 安徽理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫與檢驗教研室;安徽理工大學(xué)免疫與感染研究所;安徽理工大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(61170172,81202294,81172778,81302524) 安徽省自然科學(xué)基金(1208085QH162,KJ2013A105) 大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(AH201310361188,AH201310361189,AH201310361190,201310361096)
【分類號】：R392-33;R378.911
【正文快照】： 近年來,隨著感染多重耐藥結(jié)核菌的患者大量出現(xiàn),抗癆藥物治療結(jié)核病愈加困難,新型抗結(jié)核疫苗的研究迫在眉睫[1-2]。細胞自噬作為真核細胞中胞內(nèi)成分的分解代謝途徑,近些年被發(fā)現(xiàn)在適應(yīng)性免疫中具有促進MHCⅡ類抗原提呈的作用,同時能夠協(xié)調(diào)MHCⅠ和MHCⅡ的交叉提呈[3],這為通過

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本文編號：1272115