本文關(guān)鍵詞：體外血腦屏障模型的建立及功能測(cè)定

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【摘要】：目的利用大鼠原代微血管內(nèi)皮細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞建立體外血腦屏障模型,并通過(guò)跨內(nèi)皮細(xì)胞電阻(Trans-epithelium electrical resistant,TEER)方法對(duì)血腦屏障模型進(jìn)行功能測(cè)定。方法原代分離純化SD大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞,用免疫熒光檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物VWF,緊密連接蛋白ZO-1,星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP;用微血管內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞在Transwell小室上建立體外血腦屏障模型,觀察TEER值的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果原代的微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)至融合后具有典型的梭形"鋪路石"樣外觀,VWF鑒定細(xì)胞純度達(dá)到95%以上,ZO-1免疫熒光鑒定證實(shí)細(xì)胞間形成緊密連接;原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞呈現(xiàn)具有多個(gè)突起的典型形態(tài),GFAP鑒定細(xì)胞純度達(dá)到95%以上;在第10 d,單獨(dú)微血管內(nèi)皮細(xì)胞血腦屏障模型的TEER值為(42±1.41)Ωcm2,內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)血腦屏障模型的TEER值為(65±1.42)Ωcm2。結(jié)論建立了體外血腦屏障模型,通過(guò)TEER值測(cè)定證明共培養(yǎng)使模型更加完整,更加接近在體血腦屏障模型的特性。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81000521,81030021)
【分類(lèi)號(hào)】：R-332;R741
【正文快照】： 血腦屏障由沿著中樞神經(jīng)系統(tǒng)微血管排列的內(nèi)皮細(xì)胞行成,在維持神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)通訊所需的精密調(diào)節(jié)的微環(huán)境中起著重要的作用[1]。血腦屏障的主要作用有4條:(1)維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài);(2)將腦組織與血流分開(kāi),保護(hù)腦組織免受血流中細(xì)胞成分的影響;(3)通過(guò)特定的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)持續(xù)提供養(yǎng)分

【相似文獻(xiàn)】

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