本文關鍵詞：五種常用輪狀病毒檢測方法的評價及應用策略

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【摘要】：目的比較膠體金免疫層析法(GICA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)、實時熒光定量-反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(real-time RT-PCR)和聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)5種常用的輪狀病毒檢測方法的準確性。方法取A組輪狀病毒陽性標本,經(jīng)1×101~1×10810倍系列稀釋,采用上述5種方法平行檢測,比較檢測限;選擇分別含有以下9種病原體且輪狀病毒證實為陰性的糞便標本作為陰性對照:脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗株Ⅰ~Ⅲ型、腸道病毒EV71、柯薩奇病毒A16、ECHO病毒6、諾如病毒Ⅰ型、諾如病毒Ⅱ型和星狀病毒,采用上述5種方法平行檢測,比較特異性;采用上述方法,分別對184例嬰幼兒腹瀉糞便標本進行檢測,以PAGE檢測結果作為參考標準,比較其余4種方法的靈敏度和特異性。結果上述5種方法檢測A組輪狀病毒的檢測限相差5個數(shù)量級,分別為:real-time RT-PCR法10-6稀釋度,膠體金法10-3稀釋度,ELISA和PAGE方法均為10-2稀釋度,RT-PCR法10-1稀釋度;5種方法對9種對照病原體均無交叉反應;以PAGE方法檢測結果作為標準,real-time RT-PCR、ELISA、膠體金和RT-PCR靈敏度分別為95.45%、96.97%、93.94%和62.12%,特異性分別為82.2%、86.44%、82.20%和94.07%。結論 PAGE作為檢測輪狀病毒的經(jīng)典方法,具有高特異性,可用于確認實驗;real-time RT-PCR方法檢測A組輪狀病毒的靈敏度優(yōu)于其他4種方法,可用于輪狀病毒的高通量檢測;ELISA和膠體金方法具有良好的靈敏度與特異性,且膠體金方法成本低,可用于初篩檢測;行業(yè)標準推薦的RT-PCR方法特異性較高,但靈敏度較低,有待改進。
【作者單位】： 北京市疾病預防控制中心免疫預防所;河北出入境檢驗檢疫局國際旅行衛(wèi)生保健中心;
【分類號】：R373.22
【正文快照】： 輪狀病毒是人類、哺乳動物和鳥類腹瀉的重要病原體,屬于呼腸孤病毒科輪狀病毒屬,雙鏈RNA病毒,基因組分11個節(jié)段,有7個血清組(A~G),其中A~C組與人類疾病有關,A組輪狀病毒主要引起兒童腹瀉,是世界范圍內(nèi)嬰幼兒重癥腹瀉最重要的病原體,占病毒性胃腸炎的80%以上,是嬰幼兒死亡的主

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