本文關(guān)鍵詞：不同劑量骨保護素對破骨細胞內(nèi)一氧化氮生成及內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響

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【摘要】：背景:骨保護素和一氧化氮在防治骨質(zhì)疏松方面有重要作用,但目前關(guān)于兩者在抑制破骨細胞增殖分化方面的關(guān)系研究較少。目的:驗證不同劑量的骨保護素對破骨細胞內(nèi)生成一氧化氮量及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性的影響。方法:用抗酒石酸酸性磷酸酶染色驗證誘導(dǎo)生成的破骨細胞;將誘導(dǎo)生成的破骨細胞分成6個組,空白對照組不加任何試劑;陰性對照組培養(yǎng)液中加入培養(yǎng)液;骨保護素組分為4組分別加入10,25,50,75μg/L不同劑量的骨保護素試劑。采用Annexinv-FITC細胞凋亡檢測試劑盒,利用流式細胞儀測定破骨細胞凋亡率;熒光定量PCR檢測破骨細胞標志基因抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA及蛋白激酶K mRNA的表達量變化;一氧化氮檢測試劑盒檢測破骨細胞中內(nèi)一氧化氮濃度;內(nèi)皮型一氧化氮合成酶活力試劑盒檢測破骨細胞內(nèi)一氧化氮合酶的活力;骨保護素各組加入內(nèi)皮細胞型一氧化氮合酶抑制劑;熒光定量PCR檢測破骨細胞特異性酶抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA及蛋白激酶K mRNA表達量的變化。結(jié)果與結(jié)論:1骨保護素可以抑制破骨細胞的分化生成并誘導(dǎo)其凋亡。2骨保護素的質(zhì)量濃度與誘導(dǎo)生成的破骨細胞數(shù)量及其標志酶mRNA的表達量呈負相關(guān),與破骨細胞凋亡率呈正相關(guān)。3骨保護素可以增加破骨細胞內(nèi)一氧化氮的生成以及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性的升高;骨保護素的質(zhì)量濃度與破骨細胞生成的一氧化氮濃度及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性呈正相關(guān)。4Raw264.7細胞在體外培養(yǎng)條件下,骨保護素與一氧化氮在抑制破骨細胞生成及促進其凋亡方面有協(xié)同作用,推測兩者之間可能存在骨保護素/內(nèi)皮型一氧化氮合酶/一氧化氮信號通路。
【作者單位】： 中南大學(xué);中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院;
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 文章亮點:實驗驗證了骨保護素可以抑制破骨細胞的增殖分化以及誘導(dǎo)其凋亡的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨保護素可以增加破骨細胞內(nèi)一氧化氮的水平及內(nèi)皮型一氧化氮合酶的活性,并且在一定濃度范圍內(nèi)骨保護素與一氧化氮含量及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性存在正相關(guān);然而加入內(nèi)皮型一氧化氮合酶

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