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不同劑量骨保護(hù)素對(duì)破骨細(xì)胞內(nèi)一氧化氮生成及內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-12-05 20:00

  本文關(guān)鍵詞:不同劑量骨保護(hù)素對(duì)破骨細(xì)胞內(nèi)一氧化氮生成及內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響


  更多相關(guān)文章: 骨保護(hù)素 破骨細(xì)胞 蛋白激酶類 組織構(gòu)建 骨組織工程 一氧化氮 抗酒石酸酸性磷酸酶 蛋白激酶K


【摘要】:背景:骨保護(hù)素和一氧化氮在防治骨質(zhì)疏松方面有重要作用,但目前關(guān)于兩者在抑制破骨細(xì)胞增殖分化方面的關(guān)系研究較少。目的:驗(yàn)證不同劑量的骨保護(hù)素對(duì)破骨細(xì)胞內(nèi)生成一氧化氮量及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性的影響。方法:用抗酒石酸酸性磷酸酶染色驗(yàn)證誘導(dǎo)生成的破骨細(xì)胞;將誘導(dǎo)生成的破骨細(xì)胞分成6個(gè)組,空白對(duì)照組不加任何試劑;陰性對(duì)照組培養(yǎng)液中加入培養(yǎng)液;骨保護(hù)素組分為4組分別加入10,25,50,75μg/L不同劑量的骨保護(hù)素試劑。采用Annexinv-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒,利用流式細(xì)胞儀測定破骨細(xì)胞凋亡率;熒光定量PCR檢測破骨細(xì)胞標(biāo)志基因抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA及蛋白激酶K mRNA的表達(dá)量變化;一氧化氮檢測試劑盒檢測破骨細(xì)胞中內(nèi)一氧化氮濃度;內(nèi)皮型一氧化氮合成酶活力試劑盒檢測破骨細(xì)胞內(nèi)一氧化氮合酶的活力;骨保護(hù)素各組加入內(nèi)皮細(xì)胞型一氧化氮合酶抑制劑;熒光定量PCR檢測破骨細(xì)胞特異性酶抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA及蛋白激酶K mRNA表達(dá)量的變化。結(jié)果與結(jié)論:1骨保護(hù)素可以抑制破骨細(xì)胞的分化生成并誘導(dǎo)其凋亡。2骨保護(hù)素的質(zhì)量濃度與誘導(dǎo)生成的破骨細(xì)胞數(shù)量及其標(biāo)志酶mRNA的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān),與破骨細(xì)胞凋亡率呈正相關(guān)。3骨保護(hù)素可以增加破骨細(xì)胞內(nèi)一氧化氮的生成以及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性的升高;骨保護(hù)素的質(zhì)量濃度與破骨細(xì)胞生成的一氧化氮濃度及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性呈正相關(guān)。4Raw264.7細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下,骨保護(hù)素與一氧化氮在抑制破骨細(xì)胞生成及促進(jìn)其凋亡方面有協(xié)同作用,推測兩者之間可能存在骨保護(hù)素/內(nèi)皮型一氧化氮合酶/一氧化氮信號(hào)通路。
【作者單位】: 中南大學(xué);中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院;
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了骨保護(hù)素可以抑制破骨細(xì)胞的增殖分化以及誘導(dǎo)其凋亡的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨保護(hù)素可以增加破骨細(xì)胞內(nèi)一氧化氮的水平及內(nèi)皮型一氧化氮合酶的活性,并且在一定濃度范圍內(nèi)骨保護(hù)素與一氧化氮含量及內(nèi)皮型一氧化氮合酶活性存在正相關(guān);然而加入內(nèi)皮型一氧化氮合酶

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本文編號(hào):1255984

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