本文關鍵詞：人TOP2A單克隆抗體的制備與初步應用

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【摘要】：目的制備抗TOP2A(DNA拓撲異構酶Ⅱ型α)單克隆抗體并對其生物學特性進行鑒定。方法應用分子生物學技術構建含人TOP2A編碼序列的原核表達載體,表達并純化人TOP2A蛋白。TOP2A蛋白皮下多點和腹腔注射加強免疫Balb/c小鼠,取脾與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0進行融合,利用間接ELISA方法篩選雜交瘤細胞,采用有限稀釋法進行亞克隆,用免疫印跡法、免疫組化染色和流式細胞術對抗體進行特異性鑒定。結果獲得了3株能夠穩(wěn)定分泌TOP2A單克隆抗體的雜交瘤細胞,分別命名為11G5、3B10和10A3,通過免疫印跡、免疫組化和流式結果驗證均為陽性。結論成功制備TOP2A單克隆抗體,為進一步的TOP2A蛋白的表達與腫瘤的關系研究奠定了基礎。
【作者單位】： 江南大學藥學院分子設計與藥理學實驗室;
【分類號】：R392
【正文快照】： DNA復制是生命的開始,DNA不論線性的還是環(huán)狀的都是超螺旋的,DNA的轉(zhuǎn)錄、復制、翻譯和重組都需要將它的超螺旋給解開,這就需要DNA拓撲異構酶的參與,DNA拓撲異構酶的活性及含量也可以作為細胞或者個體生命活性的一種體現(xiàn),所以在腫瘤細胞中拓撲異構酶的含量要高于正常細胞,這就

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