本文關(guān)鍵詞：人TOP2A單克隆抗體的制備與初步應(yīng)用

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【摘要】：目的制備抗TOP2A(DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ型α)單克隆抗體并對其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。方法應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建含人TOP2A編碼序列的原核表達(dá)載體,表達(dá)并純化人TOP2A蛋白。TOP2A蛋白皮下多點(diǎn)和腹腔注射加強(qiáng)免疫Balb/c小鼠,取脾與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2/0進(jìn)行融合,利用間接ELISA方法篩選雜交瘤細(xì)胞,采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆,用免疫印跡法、免疫組化染色和流式細(xì)胞術(shù)對抗體進(jìn)行特異性鑒定。結(jié)果獲得了3株能夠穩(wěn)定分泌TOP2A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,分別命名為11G5、3B10和10A3,通過免疫印跡、免疫組化和流式結(jié)果驗(yàn)證均為陽性。結(jié)論成功制備TOP2A單克隆抗體,為進(jìn)一步的TOP2A蛋白的表達(dá)與腫瘤的關(guān)系研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 江南大學(xué)藥學(xué)院分子設(shè)計(jì)與藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： DNA復(fù)制是生命的開始,DNA不論線性的還是環(huán)狀的都是超螺旋的,DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、翻譯和重組都需要將它的超螺旋給解開,這就需要DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶的參與,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性及含量也可以作為細(xì)胞或者個(gè)體生命活性的一種體現(xiàn),所以在腫瘤細(xì)胞中拓?fù)洚悩?gòu)酶的含量要高于正常細(xì)胞,這就

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏東;張乃生;;諾氟沙星多克隆抗體的制備[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年04期

2 詹愛軍;王新衛(wèi);王憲文;;抗H9亞型AIV血凝素單克隆抗體的制備及亞型鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年03期

3 魏東;徐彤;趙月平;黃智鴻;李秀娟;;抗阿莫西林多克隆抗體的制備[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年09期

4 胡曉苗;余為一;張丹俊;;犬血清IgG的純化、抗體制備及其鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年21期

5 周先韋;李偉莉;汪丹;萬春艷;王金芳;吳海燕;;補(bǔ)腎安胎沖劑聯(lián)合免疫療法治療反復(fù)自然流產(chǎn)40例[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

6 劉銀星,范冬梅,熊冬生,許元富,邵曉楓,許元生,彭暉,楊銘,秦嵐,朱禎平,楊純正;單價(jià)抗CD20抗體誘導(dǎo)人B細(xì)胞淋巴瘤Raji細(xì)胞的凋亡[J];癌癥;2003年12期

7 張捷;;ELISA檢測奶牛乳房炎疫苗效果方法的建立[J];氨基酸和生物資源;2009年03期

8 李華,俞建昆,洪超,龍潤?quán)l(xiāng),翟友剛,徐瓊芳,崔萍芳,丁雪鳳,謝忠平;殘余牛血清蛋白ELISA檢測方法的建立及其初步應(yīng)用[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2005年02期

9 李有田,許丹,趙莉,李宏林,董宇翔,洪英杰,張二力,張殿君,徐彩云,高文艷,霍毓萍,李秋波,李曉春;三參滋胃飲對慢性萎縮性胃炎大鼠胃黏膜G細(xì)胞和D細(xì)胞的作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年01期

10 白靚;金寧一;成巖;石毅;魯會(huì)軍;田明堯;南文龍;趙翠青;張金雙;關(guān)銘;;雙亞型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫原性檢測[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年02期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳克研;豬血凝性腦脊髓炎免疫層析檢測試紙及其滅活疫苗的研制[D];吉林大學(xué);2011年

2 吳君;基于β_3-AR探討縮泉丸補(bǔ)腎縮尿的作用機(jī)制[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

3 成毅明;精子發(fā)生相關(guān)蛋白LM23的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

4 朱杰昌;阻斷CD40/CD40L共刺激通路聯(lián)合FTY720在小鼠心臟移植中的抗排斥反應(yīng)作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

5 郭昊;白介素35基因治療協(xié)同地西他濱抑制小鼠心臟移植排斥反應(yīng)的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

6 陳楊;PPV和PCV2核酸疫苗及PRV-PPV-PCV2基因工程疫苗的研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 張博;H1N1亞型豬流感病毒分離鑒定、鑒別診斷及M2e重組質(zhì)粒免疫效力研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 何健;自然霉變玉米對肉鴨生產(chǎn)性能和免疫功能的影響及機(jī)制研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 胡崇偉;去甲腎上腺素與鋁免疫毒性的關(guān)系[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

10 任彥順;大鼠脾切除并不同體積肝切除后肝臟再生調(diào)控機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張利芳;苦瓜多糖的純化及其免疫和抗氧化活性作用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 徐娟;T-2毒素多克隆抗體的制備及其化學(xué)發(fā)光免疫檢測的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 譚雯雯;豬β-防御素2多克隆和單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 崔翔;動(dòng)物可食組織中安眠酮?dú)埩舻腅LISA檢測方法研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 賈麗鋒;A型流感病毒NP蛋白的原核表達(dá)及初步應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2010年

6 趙秀新;牛消化道Ⅰ型肽載體（bPepTⅠ）部分序列的克隆、表達(dá)及多克隆抗體的制備[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

7 白建芳;百合雙價(jià)抗病毒載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D];大連理工大學(xué);2010年

8 王駿俊;雞血清IgG的純化及其單抗制備與鑒定[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 秦倩茹;抗卵清蛋白單克隆抗體的制備及卵清蛋白、醇溶蛋白ELISA檢測方法的建立[D];中國海洋大學(xué);2010年

10 李子平;牛附紅細(xì)胞體特異性抗原制備及雙抗體夾心ELISA診斷方法的建立[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;單克隆抗體的治療潛能[J];中國新藥雜志;2000年07期

2 高紅旺,張秀榮,許英愛,王雅君;單克隆抗體在抗癌領(lǐng)域中的應(yīng)用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年02期

3 汪保安,汪寅章,夏風(fēng)城,陸思珍,黃兆堅(jiān),郭愛巖,馬芳玲,張育青;促腎上腺皮質(zhì)激素單克隆抗體的篩選和鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2001年05期

4 楊聯(lián)萍,單中元,佟明華,易學(xué)瑞,萬華印,曾平魯,孔祥平;一組抗重組人肝再生增強(qiáng)因子單克隆抗體的制備與鑒定[J];中國病理生理雜志;2001年05期

5 吳向東,李保仝,邵海楓,宗永蘭,齊名,武建國;人紅細(xì)胞血型糖蛋白A單克隆抗體的初步鑒定[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2001年01期

6 李琦,歐陽為明,賈衛(wèi),劉雪松,韓衛(wèi)寧,劉飛,謝鑫,蘇麗,金伯泉;抗人白細(xì)胞介素-4單克隆抗體的制備及應(yīng)用研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年04期

7 楊唐斌,曲麗娜;單克隆抗體研究新進(jìn)展[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2002年06期

8 邵曉楓,熊冬生,李容,彭暉,劉嘉,楊銘,許元富,范冬梅,朱楨平,楊純正;抗KDR3單克隆抗體的制備和生物活性的鑒定[J];中國腫瘤臨床;2003年11期

9 馬穎,鄒全明,朱永紅,羅萍,毛旭虎;抗重組人白細(xì)胞介素18單克隆抗體的制備與特性研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2003年06期

10 霍晨敏,朱昀,孫進(jìn)偉,吳立柱,沈銀柱,黃占景;單克隆抗體制劑的最新進(jìn)展[J];河北師范大學(xué)學(xué)報(bào);2004年05期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊智紅;熊承良;;尿激酶型纖溶酶原激活因子單克隆抗體的制備及鑒定[A];湘鄂贛首屆性與生殖健康學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2007年

2 李偉;林志;齊衛(wèi)紅;梁春男;楊艷偉;汪巨峰;李波;;抗VEGF單克隆抗體的臨床前安全性評價(jià)[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

3 沈泓;梅建鳳;朱克寅;李敏;應(yīng)國清;;人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體的制備[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

4 寧云山;司徒維娜;李妍;彭丹丹;洪燕華;劉宜楚;賀福初;孫啟鴻;李明;;人類血漿蛋白單克隆抗體庫的初步建立及應(yīng)用研究[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

5 尹鐵英;王亞洲;王貴學(xué);;血小板膜糖蛋白單克隆抗體在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病中的應(yīng)用[A];2007第一屆全國介入醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

6 曲海霞;胡和平;孫啟鴻;;鼠抗人醛脫氫酶1A1單克隆抗體的制備與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 鞠吉雨;周群芳;王麗娜;邸大琳;;抗人骨橋蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

8 劉健宏;王標(biāo);莊向生;王長兵;周倫江;劉玉濤;;單克隆抗體與免疫熒光染色技術(shù)[A];福建省科協(xié)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)衛(wèi)星會(huì)議——畜牧業(yè)持續(xù)發(fā)展對策學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

9 安星蘭;陸梅生;李萬波;安鐵洙;滕春波;;人肌紅蛋白單克隆抗體的制備[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十七次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2012年

10 邴國霞;張鶴曉;張利峰;吳清民;劉金華;段向英;江育林;;鯉春病毒單克隆抗體的研制及其初步應(yīng)用[A];京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會(huì)暨新思想、新觀點(diǎn)、新方法論壇論文集[C];2008年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 尹暉;單克隆抗體研發(fā)進(jìn)入新階段[N];無錫日報(bào);2010年

2 編譯 李勇;單克隆抗體：生物類似藥開發(fā)的秘鑰[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

3 廣凱;單克隆抗體藥物將有大發(fā)展[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

4 ;單克隆抗體應(yīng)用前景看好[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

5 黃東臨;羅氏叱咤單克隆抗體市場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

6 ;單克隆抗體異軍突起[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

7 尹暉;全球最大單克隆抗體研制基地落戶無錫[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

8 尹暉;最大單克隆抗體研制項(xiàng)目在馬山奠基[N];無錫日報(bào);2010年

9 數(shù)文;羅氏買進(jìn)抗癌單克隆抗體[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

10 毛文波;單克隆抗體：征服癌癥的新方法[N];科技日報(bào);2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白宇;馬γ-干擾素單克隆抗體的制備及細(xì)胞免疫評價(jià)方法的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

2 余自強(qiáng);抗血小板膠原受體糖蛋白VI單克隆抗體的制備和功能研究[D];蘇州大學(xué);2005年

3 秦克鋒;單純皰疹病毒糖蛋白的特性研究及其單克隆抗體的臨床應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1989年

4 游曉華;腦鈉肽單克隆抗體的制備及初步臨床應(yīng)用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 胡敏;載脂蛋白M重組蛋白和單克隆抗體的制備及其初步臨床應(yīng)用[D];中南大學(xué);2008年

6 溫新宇;人CD38分子的克隆表達(dá)、單克隆抗體的制備及其功能的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

7 秦迎松;人促血液血管細(xì)胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

8 張雪芳;抗gremlin 1單克隆抗體的制備和初步鑒定[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

9 李振宇;抗FVⅢ-C2區(qū)單克隆抗體的制備及功能研究[D];蘇州大學(xué);2009年

10 夏永娟;抗鰻弧菌獨(dú)特型單克隆抗體的研制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬泓冰;幾種單克隆抗體純化方法的比較性研究[D];蘇州大學(xué);2005年

2 許靜;小鼠抗蛋清提取物單克隆抗體的制備與初步鑒定[D];南昌大學(xué);2007年

3 王林林;抗人早孕因子單克隆抗體的制備[D];鄭州大學(xué);2011年

4 張朋;鯉春病毒血癥病毒單克隆抗體的制備及其免疫學(xué)檢測方法的建立[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 鄭怡麟;抗人降鈣素原特異性單克隆抗體的制備及其免疫傳感器的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 高曉飛;人紅細(xì)胞血型糖蛋白B單克隆抗體的制備[D];揚(yáng)州大學(xué);2007年

7 李濤;抗黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備與特性鑒定[D];山東師范大學(xué);2008年

8 何靖玄;琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)移酶硝基化酪氨酸位點(diǎn)特異單克隆抗體的制備[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 于海雙;普洱茶茶褐素單克隆抗體的制備[D];長春理工大學(xué);2012年

10 譚雯雯;豬β-防御素2多克隆和單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：1251210