本文關(guān)鍵詞：血管段孵育和原代血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)的比較

  更多相關(guān)文章： 腸系膜動(dòng)脈 原代培養(yǎng) 血管段孵育 平滑肌細(xì)胞 尼氟滅酸

【摘要】：探討微血管段孵育方法能否與原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)一樣檢測(cè)蛋白表達(dá),以用于初步的基礎(chǔ)研究,解決原代培養(yǎng)耗時(shí)、不易存活的問(wèn)題。分離大鼠腸系膜動(dòng)脈三級(jí)以下分支,使用膠原酶和木瓜蛋白酶混合消化單個(gè)血管平滑肌細(xì)胞,獲取的平滑肌細(xì)胞采用含20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞經(jīng)特異性的α-actin進(jìn)行免疫組化鑒定;血管段孵育是在無(wú)菌條件下分離大鼠腸系膜動(dòng)脈三級(jí)以下分支,培養(yǎng)基孵育72 h。分別使用不同濃度的尼氟滅酸(niflumic acid,NFA)孵育原代培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞和腸系膜三級(jí)分支血管段24 h,觀察平滑肌細(xì)胞連接蛋白43(connexin43,Cx43)的變化。形態(tài)學(xué)和免疫組織化學(xué)鑒定表明,培養(yǎng)的原代細(xì)胞為血管平滑肌細(xì)胞。不同濃度NFA處理原代平滑肌細(xì)胞能夠使Cx43表達(dá)量呈濃度依賴性下降,相對(duì)于對(duì)照組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);不同濃度NFA處理血管段能夠使Cx43的表達(dá)量也呈濃度依賴性下降,相對(duì)于對(duì)照組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。由此可知,觀察平滑肌細(xì)胞特異性蛋白Cx43的表達(dá)情況,使用血管段孵育的方法檢測(cè)結(jié)果與細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果相似。血管段孵育簡(jiǎn)單易行,可以作為類(lèi)似實(shí)驗(yàn)的初步研究。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室/新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)前期研究專項(xiàng)(2012CB26600) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260247) 新疆兵團(tuán)科技攻關(guān)計(jì)劃(2010GG34) 新疆兵團(tuán)醫(yī)藥衛(wèi)生專項(xiàng)(2012BA021)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物、醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛[1],但有些部位的細(xì)胞又不能夠形成穩(wěn)定的細(xì)胞株,如微小血管的平滑肌細(xì)胞,只能通過(guò)原代培養(yǎng)來(lái)進(jìn)行研究。然而,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不僅對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn)要求很高,而且不容易掌握[2]。目前,細(xì)胞原代培養(yǎng)可以分為組織貼壁法和酶消化

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 周曉莉,雷寒,柳青;血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年06期

2 鄭輝;薛松;連鋒;黃日太;胡振雷;;兔血管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)及生長(zhǎng)特性研究[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年09期

3 王恩幫;鐘華;羅小林;梁霄;鄧峰美;司軍強(qiáng);何芳;;縫隙連接在同型半胱氨酸介導(dǎo)的高血壓大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖中的作用[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年04期

4 劉幸平;劉清;鄭燕珊;黃展勤;;大鼠血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年03期

5 劉紅梅,黃體鋼;血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及其在心血管疾病研究中的應(yīng)用[J];實(shí)用心腦肺血管病雜志;2005年06期

6 占今舜;邢月騰;張彬;;細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];飼料博覽;2013年01期

7 蔣學(xué)偉;馬克濤;李麗;趙磊;魏麗麗;陳新燕;司軍強(qiáng);;微小動(dòng)脈血管離體標(biāo)本的直徑測(cè)量技術(shù)[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年02期

8 王宇朋;王萍;李敏;陳海平;王翠英;李虹偉;;外源性過(guò)氧亞硝酸鹽對(duì)大鼠血管收縮功能的影響的研究[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年09期

9 丘欽英;周家國(guó);劉玉潔;關(guān)永源;;大鼠腦基底動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)及功能鑒定[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2007年11期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉洪付;李京敏;李宇s，

本文編號(hào)：1241245