發(fā)布時(shí)間：2017-11-27 11:00

  本文關(guān)鍵詞：人凝血因子IX的線性B細(xì)胞表位預(yù)測(cè)及鑒定

  更多相關(guān)文章： FIX B表位預(yù)測(cè) B表位移植 B表位鑒定

【摘要】：為預(yù)測(cè)并鑒定人凝血因子IX(FIX)的線性B細(xì)胞表位.通過IEDB數(shù)據(jù)庫及Discovery Studio軟件預(yù)測(cè)FIX的B表位和白喉毒素T結(jié)構(gòu)域(DTT)的B表位,用所預(yù)測(cè)的FIX的B表位替換某預(yù)測(cè)的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通過基因工程技術(shù)制備各重組蛋白,并免疫小鼠,通過ELISA和Western-blot檢測(cè)抗血清效價(jià)和特異性,通過等溫量熱滴定技術(shù)(ITC)測(cè)定抗體的親和力.預(yù)測(cè)到4個(gè)FIX的B表位.用重組蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠產(chǎn)生了識(shí)別完整FIX的抗體,該抗體具有良好的特異性,其結(jié)合常數(shù)KD為106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重組蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能夠產(chǎn)生特異性識(shí)別FIX且親和力溫和的抗體.
【作者單位】： 微生物代謝國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院上海交通大學(xué);
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)(重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng))資助(2014ZX09101043)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 引言凝血因子IX(Human coagulation factor IX,FIX)是人體凝血系統(tǒng)中一個(gè)非常重要的凝血因子,其缺乏會(huì)導(dǎo)致血友病B.該病的治療主要依賴于終身注射FIX制劑[1,2].FIX制劑主要包括血源FIX和重組FIX,它們都需要從相應(yīng)的混合物中進(jìn)行分離純化.傳統(tǒng)的FIX純化方法包括磷酸鈣吸附法、，

本文編號(hào)：1231592