本文關鍵詞：人凝血因子IX的線性B細胞表位預測及鑒定

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【摘要】：為預測并鑒定人凝血因子IX(FIX)的線性B細胞表位.通過IEDB數(shù)據(jù)庫及Discovery Studio軟件預測FIX的B表位和白喉毒素T結構域(DTT)的B表位,用所預測的FIX的B表位替換某預測的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通過基因工程技術制備各重組蛋白,并免疫小鼠,通過ELISA和Western-blot檢測抗血清效價和特異性,通過等溫量熱滴定技術(ITC)測定抗體的親和力.預測到4個FIX的B表位.用重組蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠產生了識別完整FIX的抗體,該抗體具有良好的特異性,其結合常數(shù)KD為106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重組蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能夠產生特異性識別FIX且親和力溫和的抗體.
【作者單位】： 微生物代謝國家重點實驗室 生命科學技術學院上海交通大學;
【基金】：國家科技重大專項(重大新藥創(chuàng)制專項)資助(2014ZX09101043)
【分類號】：R392
【正文快照】： 引言凝血因子IX(Human coagulation factor IX,FIX)是人體凝血系統(tǒng)中一個非常重要的凝血因子,其缺乏會導致血友病B.該病的治療主要依賴于終身注射FIX制劑[1,2].FIX制劑主要包括血源FIX和重組FIX,它們都需要從相應的混合物中進行分離純化.傳統(tǒng)的FIX純化方法包括磷酸鈣吸附法、，

本文編號：1231592