本文關(guān)鍵詞：過早衰老髓核細(xì)胞微環(huán)境中BMSCs的生物學(xué)行為研究

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【摘要】：目的探討在過早衰老髓核細(xì)胞(nucleus pulposus cells,NPCs)微環(huán)境中BMSCs的生物學(xué)行為,為充分利用BMSCs干細(xì)胞特性進(jìn)行退變椎間盤修復(fù)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法收集人退變髓核組織與正常骨髓組織進(jìn)行NPCs、BMSCs分離、培養(yǎng)及鑒定;對(duì)過早衰老誘導(dǎo)的第1代NPCs和正常第3代BMSCs行非接觸共培養(yǎng),根據(jù)NPCs與BMSCs不同比例將實(shí)驗(yàn)分為A組(75%∶25%)、B組(50%∶50%)和C組(0∶100%)。倒置相差顯微鏡和透射電鏡觀察各組BMSCs形態(tài)變化;對(duì)培養(yǎng)3、6 d的BMSCs進(jìn)行增殖能力檢測(cè):細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8檢測(cè)細(xì)胞活力、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期、BrdU標(biāo)記流式檢測(cè)DNA代謝;培養(yǎng)6 d檢測(cè)衰老相關(guān)β半乳糖苷酶(senescence associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)活性評(píng)價(jià)細(xì)胞衰老。結(jié)果倒置相差顯微鏡示A、B組BMSCs中混雜的三角形或大多角形細(xì)胞增多,尤其是A組;透射電鏡觀察A、B組均可見典型衰老形態(tài)的細(xì)胞。培養(yǎng)3、6 d,A組細(xì)胞存活率均顯著低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 d時(shí),A組G1期細(xì)胞比例明顯高于B、C組(P0.05),S期細(xì)胞比例明顯低于B、C組(P0.05)。6 d時(shí),A組約81.0%細(xì)胞停滯于G1期,S期及G2期細(xì)胞比例減小,與B、C組比較各細(xì)胞周期分布差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);B組細(xì)胞停滯于G1期比例增加至約74.4%,與C組比較各細(xì)胞周期分布差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)3、6 d,A組摻入的BrdU含量均明顯低于B、C組(P0.05);B、C組間3 d時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),6 d時(shí)B組明顯低于C組(P0.05)。培養(yǎng)6 d,A、B組SA-β-gal活性顯著提高,3組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論過早衰老的NPCs可通過旁分泌效應(yīng)下調(diào)共培養(yǎng)的BMSCs增殖能力,而NPCs數(shù)量上的優(yōu)勢(shì)使得共培養(yǎng)的BMSCs更早表現(xiàn)出衰老特征。
【作者單位】： 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31070876、81071493) National Natural Science Foundation of China(31070876,81071493)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： BMSCs移植為退變椎間盤的細(xì)胞重建及功能恢復(fù)提供了一種全新治療策略,已顯示出巨大潛能[1-4]。但退變椎間盤由于存在生長(zhǎng)因子匱乏、營(yíng)養(yǎng)障礙、異常細(xì)胞接觸等應(yīng)激因素[5-6],可能會(huì)導(dǎo)致移植的BMSCs干細(xì)胞特性發(fā)生改變,從而不利于退變椎間盤生物學(xué)修復(fù)。與多次分裂后端粒縮短引

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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