本文關(guān)鍵詞：3種獲得中性粒細(xì)胞方法的比較及應(yīng)用的探討

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【摘要】：目的比較誘導(dǎo)髓系白血病細(xì)胞株分化法、外周血分離純化法、誘導(dǎo)造血干細(xì)胞定向分化法3種獲得中性粒細(xì)胞的方法。方法用1μmol/L全反式維甲酸(ATRA)誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化;用紅細(xì)胞裂解法結(jié)合免疫磁珠法分離純化外周血中性粒細(xì)胞;用Percoll密度梯度離心法結(jié)合免疫磁珠法分離純化外周血干細(xì)胞,然后用GM-CSF和G-CSF誘導(dǎo)粒細(xì)胞的產(chǎn)生。3種方法獲得的細(xì)胞通過MGG染色檢測細(xì)胞形態(tài)及中性粒細(xì)胞純度,利用免疫熒光技術(shù)檢測CD18蛋白的表達(dá)及胞內(nèi)分布特點。結(jié)果誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化可獲得約40%的中性粒細(xì)胞,從外周血分離純化的中性粒細(xì)胞純度約為90%,通過誘導(dǎo)造血干細(xì)胞定向分化可獲得70%以上的中性粒細(xì)胞。免疫熒光結(jié)果顯示,3種方法獲得的中性粒細(xì)胞,CD18蛋白的表達(dá)強度無明顯不同,也都呈現(xiàn)點狀分布。結(jié)論紅細(xì)胞裂解法結(jié)合免疫磁珠法分離純化外周血中性粒細(xì)胞,純度高、活性好,有利于快速檢測新鮮血液樣本中的中性粒細(xì)胞;誘導(dǎo)造血干細(xì)胞定向分化獲得的中性粒細(xì)胞,活性高,可在體外維持長達(dá)幾天之久,可應(yīng)用于中性粒細(xì)胞長時間的體外試驗。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系/天津市細(xì)胞與分子免疫學(xué)重點實驗室/國家教育部免疫微環(huán)境與疾病重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31071217)
【分類號】：R392
【正文快照】： 中性粒細(xì)胞是體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞,中性粒細(xì)胞參與、促進(jìn)炎癥反應(yīng),有利于機體的免疫防御,但是炎性反應(yīng)也會對機體組織產(chǎn)生損傷[1],因為炎癥部位大量中性粒細(xì)胞釋放的溶酶體顆粒不但可殺滅病原微生物,同時對自身組織細(xì)胞也有很強的細(xì)胞毒作用[2]。因此可見,中性粒細(xì)胞的凋亡有利

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