人骨髓間充質(zhì)干細胞向汗腺樣細胞誘導(dǎo)分化的研究
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【摘要】:目的:觀察體外熱休克汗腺細胞(SGCs)和人骨髓間充質(zhì)干細胞(BM-MSCs)共培養(yǎng)體系中BMMSCs的形態(tài)和表型變化,為進一步表觀遺傳學(xué)表達譜的檢測及汗腺誘導(dǎo)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的研究提供實驗基礎(chǔ)。方法:體外分離、培養(yǎng)、擴增人BM-MSCs和SGCs,成骨和成脂誘導(dǎo)分化以鑒定BM—MSCs的分化功能。在Transwell間接共培養(yǎng)體系中,培養(yǎng)的BM-MSCs和經(jīng)47℃高溫處理造成熱休克的SGCs在Transwell板中間接共培養(yǎng);在Transwell+誘導(dǎo)因子共培養(yǎng)體系中,上室的BM-MSCs培養(yǎng)基中添加了汗腺誘導(dǎo)因子(無汗性外胚葉發(fā)育不良蛋白、重組人表皮生長因子和胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-亞硒酸鈉)。監(jiān)測共培養(yǎng)過程中BM-MSCs的細胞形態(tài)變化,免疫熒光法檢測誘導(dǎo)后BM-MSCs的表型改變。結(jié)果:經(jīng)與熱休克SGCs共培養(yǎng)誘導(dǎo)10 d后,部分BM-MSCs有由長梭形變?yōu)楸馄綘疃噙呅蔚内厔?且局部細胞間連接緊密成片。BM-MSCs誘導(dǎo)前不表達CEA和CK19;BMMSCs誘導(dǎo)后,Transwell間接共培養(yǎng)體系部分細胞CEA和CKl9表達陽性,Transwell+誘導(dǎo)因子共培養(yǎng)體系CEA和CK19陽性細胞數(shù)明顯多于Transwell間接共培養(yǎng)體系。結(jié)論:熱休克汗腺細胞與BM-MSCs在Transwell間接培養(yǎng)以及相關(guān)汗腺誘導(dǎo)因子的共培養(yǎng)體系下,BM-MSCs呈現(xiàn)向SGCs誘導(dǎo)分化趨勢。
【作者單位】: 北京軍區(qū)總醫(yī)院藥理科;解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復(fù)與組織再生重點實驗室;
【基金】:國家973計劃資助項目(2012CB518105) 國家自然科學(xué)基金項目(81121004,81230041,81171798)
【分類號】:R329
【正文快照】: 人骨髓間充質(zhì)干細胞(BM-MSCs)向汗腺細胞 用IHank’s液反復(fù)漂洗小兒足部皮膚標(biāo)本,去除(SGCs)誘導(dǎo)分化的研究,為嚴(yán)重創(chuàng)傷患者汗腺組織 脂肪和凝血后置培養(yǎng)皿中,用眼科剪將皮膚剪成小重建和皮膚功能性修復(fù)提供了可能研究顯示, 于1 mmXl mm的組織小塊,加入5 ml含2 g/LII無汗性外
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,本文編號:1222931
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