本文關(guān)鍵詞：載體蛋白質(zhì)破傷風(fēng)類毒素兩種精制方法的研究

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【摘要】：目的比較兩種柱層析方法純化破傷風(fēng)類毒素(tetanus toxoid,TT或TTd)化學(xué)特性和免疫原性。方法以硫酸銨鹽析一步純化TT原液,再分別以Superdex 200和Sephacryl S-300 HR柱層析進(jìn)一步純化,并對(duì)純化TT進(jìn)行各項(xiàng)化學(xué)特性及小鼠免疫原性檢測(cè)。結(jié)果經(jīng)硫酸銨鹽析純化,TT純度可達(dá)85%左右,再經(jīng)柱層析純化后,兩種方法測(cè)定(SDS-PAGE和HPLC)TT單體含量(純度)均可達(dá)95%以上,鹽析和柱層析兩步純化后,蛋白質(zhì)回收率均在45%以上,各項(xiàng)檢定指標(biāo)均符合《中國(guó)藥典》三部(2005年版)中《吸附破傷風(fēng)疫苗制造及檢定規(guī)程》的要求;純化TT在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了較好的免疫原性。結(jié)論經(jīng)一步或多步純化可顯著提高TT的純度,并最大限度地減少TT二聚體和多聚體含量;采用兩種柱層析方法制備的純化TT具有更好的化學(xué)特性和良好的免疫原性。本實(shí)驗(yàn)為多糖-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗及其他以TT為聯(lián)合疫苗組分的疫苗提供了更加安全有效的蛋白質(zhì)。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司甘肅省疫苗工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2008BAI66B01) 國(guó)家科技重大專項(xiàng)疫苗綜合性技術(shù)研究開發(fā)大平臺(tái)建設(shè)(2013ZX09402-302-215) 國(guó)家科技部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)課題之國(guó)藥集團(tuán)技術(shù)創(chuàng)新產(chǎn)學(xué)研聯(lián)盟子課題13價(jià)肺炎球菌結(jié)合疫苗臨床前研究(2011ZX09401-403-012)
【分類號(hào)】：R378.81;R392-33
【正文快照】： 破傷風(fēng)類毒素(tetanus toxoid,TT或TTd)作為單價(jià)或吸附百白破聯(lián)合疫苗的主要成分已廣泛用于嬰幼兒及適宜人群的預(yù)防接種;隨著目前國(guó)內(nèi)外細(xì)菌性結(jié)合疫苗的迅速發(fā)展,b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗、腦膜炎球菌結(jié)合疫苗和肺炎球菌結(jié)合疫苗已有TT作為載體蛋白質(zhì)的疫苗成功上市[1-2],其

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 山本昭夫 ,赤真清人 ,王成懷;關(guān)于破傷風(fēng)類毒素副作用的研究——(一)培養(yǎng)基基礎(chǔ)材料的產(chǎn)毒效果與致敏原性[J];生物制品參考資料;1973年00期

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3 彭祥兵;破傷風(fēng)類毒素的發(fā)展歷史、現(xiàn)狀和新型破傷風(fēng)疫苗的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1997年02期

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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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2 湖北 金慰鄂　(主任技師);孕婦能否接種疫苗[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

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本文編號(hào)：1213826