本文關(guān)鍵詞：金黃色葡萄球菌轉(zhuǎn)座文庫(kù)構(gòu)建與持留突變株研究

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【摘要】：目的利用Tn917轉(zhuǎn)座子構(gòu)建金黃色葡萄球菌(簡(jiǎn)稱"金葡菌")轉(zhuǎn)座突變文庫(kù),從構(gòu)建好的文庫(kù)中篩選到持留性突變菌株。方法將含有Tn917的pID408質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化入金葡菌Newman株,利用高溫及紅霉素誘導(dǎo)使其發(fā)生轉(zhuǎn)座作用,建立轉(zhuǎn)座子文庫(kù)并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià);通過對(duì)穩(wěn)定期24 h及36 h菌液予以100 MIC達(dá)托霉素處理,之后計(jì)數(shù)活菌數(shù)目的方法,比較文庫(kù)中篩選到的特定菌株T18、T18s與野生株的持留性差異。結(jié)果建立了金葡菌Newman株轉(zhuǎn)座子文庫(kù),從中隨機(jī)挑取19個(gè)文庫(kù)子,進(jìn)行轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)測(cè)定,證實(shí)其插入隨機(jī)性良好。在培養(yǎng)24 h和36 h兩個(gè)時(shí)相點(diǎn),野生株、T18及T18s株之間持留性存在不同程度的差異。結(jié)論成功構(gòu)建了插入隨機(jī)性良好、可用于多種研究的金葡菌轉(zhuǎn)座子文庫(kù),并從中得到持留性變化菌株,且不同生長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)各株細(xì)菌之間表現(xiàn)出持留性差異。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部微生物教研室 重慶市微生物工程實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2011BB5026,CSTC2011jjA10050)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌是人類的一種重要致病菌,可產(chǎn)生多種毒力因子,引起全身多部位的多種感染,對(duì)人類危害甚大[1]。而金葡菌生物被膜與其致病性及感染難愈性密切相關(guān),在其逃避宿主及抗菌藥物殺傷作用中扮演重要角色[2-3]。持留菌(persister cells)是存在于某個(gè)細(xì)菌群體中一定比例的

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本文編號(hào)：1208611