本文關(guān)鍵詞：大鼠腔前卵泡體外培養(yǎng)方法的建立

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【摘要】：目的建立大鼠腔前卵泡的體外培養(yǎng)方法。方法取性未成熟大鼠的卵巢,按照酶消化-機(jī)械結(jié)合法分離腔前卵泡,然后采用動(dòng)態(tài)氧氣法(初始孵育時(shí)氧氣壓力為4%,以后每隔24 h氧氣壓力增加1%,直至最后的氧氣壓力為11%)、向培養(yǎng)基中添加維生素C(VC)進(jìn)行培養(yǎng),觀察獲得的卵泡數(shù)量、形態(tài),及對(duì)卵泡發(fā)育、激素生成、卵子發(fā)生的影響;并將體外卵母細(xì)胞的成熟情況與體內(nèi)卵母細(xì)胞的生長(zhǎng)情況進(jìn)行比較,以判斷體外培養(yǎng)方法是否成功。結(jié)果酶消化-機(jī)械結(jié)合法及培養(yǎng)體系可獲得大量基底膜完整的腔前卵泡;卵泡和卵母細(xì)胞直徑顯著增加,卵泡存活率91.14%、有腔卵泡形成率25.82%、卵丘細(xì)胞-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)排出率38.38%;體外培養(yǎng)卵泡分泌雌二醇(E2)和孕酮(P)與體內(nèi)分泌特征一致。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)方法可以獲得大量高質(zhì)量的腔前卵泡,且對(duì)卵泡的長(zhǎng)期培養(yǎng)發(fā)育無(wú)明顯影響,與大鼠體內(nèi)卵泡的發(fā)育一致。表明本實(shí)驗(yàn)成功建立大鼠腔前卵泡的體外培養(yǎng)方法。
【作者單位】： 天津市新藥安全評(píng)價(jià)研究中心;哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院;
【基金】：“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)“十二五”計(jì)劃(2012ZX09505001-001)
【分類號(hào)】：R321
【正文快照】： 目前,雌性生殖毒性評(píng)價(jià)主要采用整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法(包括Ⅰ段、Ⅱ段、Ⅲ段),但體內(nèi)實(shí)驗(yàn)存在所需動(dòng)物數(shù)量多、周期長(zhǎng)、費(fèi)用高等特點(diǎn),而且難以揭示化學(xué)物質(zhì)對(duì)卵泡生長(zhǎng)、激素合成以及卵子成熟等生殖學(xué)關(guān)鍵問(wèn)題。近年來(lái),雖然有關(guān)腔前卵泡的體外培養(yǎng)已在小鼠、牛、羊、豬等動(dòng)物中取得

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本文編號(hào)：1206983