發(fā)布時間：2017-11-20 01:28

  本文關(guān)鍵詞：NFκB核定位基序增強超聲微泡介導的外源基因轉(zhuǎn)染效率

  更多相關(guān)文章： 微泡 核定位信號 NFκB 基因轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的評價NFκB核定位基序增強超聲靶向微泡破壞(UTMD)介導的外源基因轉(zhuǎn)染效率的價值。方法構(gòu)建人基質(zhì)細胞衍生因子1α(phSDF-1α)質(zhì)粒(phSDF-1α組),并插入NFκB核定位基序,構(gòu)建具有核輸入功能的目的基因質(zhì)粒phSDF-1α-NFκB(phSDF-1α-NFκB)。用Cy3核酸染料標記兩種質(zhì)粒后在優(yōu)化的UTMD條件下分別轉(zhuǎn)染人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞。CCK-8檢測細胞存活率,流式細胞儀和熒光顯微鏡分別檢測質(zhì)粒的入胞效率和入核效率,RT-PCR和ELISA檢測SDF-1α基因和蛋白表達水平。比較兩種質(zhì)粒的入核效率和目的基因表達率。結(jié)果在優(yōu)化的UTMD條件下phSDF-1α組和phSDF-1α-NFκB組細胞存活率和質(zhì)粒入胞效率差異均無統(tǒng)計學意義(P均0.05),兩組質(zhì)粒入核率分別為(12.96±4.46)%和(83.25±12.15)%,SDF-1α基因相對表達量分別為(39.25±10.14)%和(118.25±27.57)%,SDF-1α蛋白表達量分別為(14.11±5.74)ng/mg和(65.35±11.12)ng/mg蛋白,后者均顯著高于前者。結(jié)論 NFκB核定位基序能顯著增強質(zhì)粒入核,提高UTMD介導的外源基因轉(zhuǎn)染效率。
【作者單位】： 武漢大學人民醫(yī)院;湖北省人民醫(yī)院超聲科;
【基金】：國家自然科學基金(81101058) 武漢市科技攻關(guān)項目(2013060602010268)
【分類號】：R346
【正文快照】： 近年來,超聲靶向微泡破壞(ultrasound targetedmicrobubbles destruction,UTMD)技術(shù)因其靶向、無毒、無免疫反應(yīng)等優(yōu)點,已成為一種新的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)[1-2]。但UTMD同樣存在轉(zhuǎn)染效率相對低下的局限性[3]。既往研究[4]利用顯微注射法向細胞內(nèi)注入質(zhì)粒DNA,結(jié)果顯示僅3%的質(zhì)粒被細

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 ;采用定位基因缺失突變技術(shù)在大腸桿菌中高效表達腫瘤壞死因子[J];第四軍醫(yī)大學學報;1991年03期

2 LORNAG．MOORE,STACYZAMUDIOLYNN,LYNNB．JORDE,LINDACURRANEVERETT,RALPHV．SHOHET,ANTONIOTORRONI,土登,次仁卓嘎,云登卓瑪;高原遺傳適應(yīng)(續(xù))[J];西藏醫(yī)藥雜志;1997年02期

3 黃巖，，石愛榮;外源性胰高血糖素對胰島B細胞形態(tài)和功能的影響[J];解剖學報;1995年02期

4 楊泉勝,楊岐生;放射雜交:一種人類染色體基因定位方法[J];生命的化學;2000年03期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 羅陽;人類BSP蛋白相關(guān)新基因的cDNA克隆、定位和表達[D];中國醫(yī)科大學;2002年

本文編號：1205621