本文關(guān)鍵詞：利用HRM技術(shù)區(qū)分ob糖尿病小鼠不同基因型

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【摘要】：ob/ob小鼠是糖尿病相關(guān)研究中使用最廣泛的動物模型之一,近年來,市場需求呈上升趨勢。與野生型小鼠相比,其瘦素蛋白基因105號密碼子發(fā)生CT點(diǎn)突變,導(dǎo)致不能產(chǎn)生正常的瘦素蛋白。該模型4周前外觀表型與野生型無異,而ob/ob純合子不育,因而在繁殖建系過程中,需要通過基因型鑒定純合、雜合和野生三種基因型。該文建立了基于高分辨率溶解曲線分析(high resolution melting analysis,HRM)的基因型鑒定方法,基因型分型結(jié)果與常規(guī)PCR加酶切方法一致,也與DNA測序結(jié)果吻合;通過該方法分型后獲得純合子小鼠外觀表型、血糖濃度參數(shù)符合預(yù)期。該方法較常規(guī)方法省時(shí)、高效、節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本,可用于大規(guī)模ob小鼠繁殖中的基因型鑒定。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院;
【基金】：國家科技支撐計(jì)劃(批準(zhǔn)號:2013BAK11B02) 中國食品藥品檢定研究院中青年中青年發(fā)展研究基金(批準(zhǔn)號:2012B5)資助的課題~~
【分類號】：R587.1;R-332
【正文快照】： 我國糖尿病患者數(shù)量龐大,總數(shù)已經(jīng)超1億[1],且隨著人口老齡化、城市化進(jìn)程加快,數(shù)量還在增加,成為國家和個(gè)人巨大的醫(yī)療負(fù)擔(dān)[2]。ob小鼠是由于10 kDa的瘦素蛋白(leptin protein)基因在105號密碼子發(fā)生CT的點(diǎn)突變,導(dǎo)致不能產(chǎn)生正常的瘦素蛋白,從而表現(xiàn)出肥胖、攝食過量、糖尿

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本文編號：1204757