結核分枝桿菌Rv1886c的原核表達及其免疫生物學特性
本文關鍵詞:結核分枝桿菌Rv1886c的原核表達及其免疫生物學特性
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【摘要】:【目的】Rv1886c基因編碼的Ag85B是結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)感染早期的分泌蛋白,本研究對其所誘導的免疫應答特性進行了探索!痉椒ā繉g85B進行原核表達和鑒定,并通過夾心ELISA、間接ELISA及ELISPOT方法測定其誘導的細胞免疫和體液免疫應答水平!窘Y果】SDS-PAGE及Western blot鑒定結果表明,以包涵體形式表達的Ag85B蛋白,經變性、復性后能與結核病人的抗血清及免疫重組李斯特菌LM-Ag85B的小鼠抗血清發(fā)生特異性反應,表明His-Ag85B融合蛋白具有較好的免疫活性。將純化的Ag85B蛋白皮下免疫C57BL/6小鼠,夾心ELISA的測定結果表明,Ag85B蛋白免疫組誘導小鼠產生的特異性IFN-γ水平顯著高于IL-4的水平(P0.001),呈現(xiàn)Th1型細胞免疫應答趨勢;以結核菌素PPD作為包被抗原,通過間接ELISA測定的血清抗體效價達到1∶6400,表明Ag85B也能誘導有效的體液免疫應答。此外,以尾靜脈途徑初次免疫小鼠42天時,ELISPOT測定結果顯示,結核分枝桿菌H37Rv誘導小鼠產生Ag85B240-259特異性的IFN-γ水平極顯著高于卡介苗(BCG)免疫組(P0.001)!窘Y論】Ag85B蛋白能激發(fā)小鼠產生較強的Th1型細胞免疫應答和較好的體液免疫應答;BCG單次免疫后誘導小鼠產生的Ag85B特異的細胞免疫應答水平較低。本研究為揭示結核分枝桿菌的致病機理、新型疫苗的研制和早期診斷試劑的開發(fā)奠定了基礎。
【作者單位】: 揚州大學江蘇省人獸共患病學重點實驗室 江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家“973項目”——國家重點基礎研究發(fā)展計劃(2012CB518805) 江蘇省自然科學基金(BK2011446) 2012年度國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(201211117021) 國家自然科學基金(31101841)~~
【分類號】:R378.911
【正文快照】: 結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)是人類結核病(tuberculosis,TB)的主要元兇,每年導致200-300萬人的死亡,新增TB患者800萬人,對人類健康所造成的嚴重威脅已引起了全球的高度關注[1]。有效的早期診斷方法和及時治療是控制TB傳播的重要手段[2]。結核分枝桿菌的表
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【相似文獻】
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本文編號:1198845
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