發(fā)布時間：2017-11-14 19:20

  本文關(guān)鍵詞：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特征及向多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化

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【摘要】：背景:羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有類似胚胎干細(xì)胞多潛能的特點(diǎn),在再生醫(yī)學(xué)等多種領(lǐng)域的臨床應(yīng)用具有廣泛的實(shí)用性和明確的良好前景。然而,目前對于羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和分化潛能的認(rèn)識仍然了解甚少。目的:建立體外分離和純化人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,檢測羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分化特點(diǎn),確定羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞在體外誘導(dǎo)條件下向多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的潛能。方法:采用胰蛋白酶和膠原酶Ⅱ分步消化法從羊膜中分離羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞和羊膜上皮細(xì)胞;采用percoll梯度離心方法對羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞和羊膜上皮細(xì)胞進(jìn)行純化;流式細(xì)胞術(shù)檢測羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志,確定羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞表面抗原的表達(dá)特征;對體外培養(yǎng)的羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成脂肪和成骨誘導(dǎo),確定其多向分化的潛能;采用神經(jīng)細(xì)胞條件培養(yǎng)體系誘導(dǎo)羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺神經(jīng)細(xì)胞分化,通過免疫熒光染色和激光共聚焦熒光顯微鏡觀察和鑒定誘導(dǎo)后多巴胺神經(jīng)元樣細(xì)胞的生成。結(jié)果與結(jié)論:從羊膜組織成功分離、純化和培養(yǎng)出羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞和羊膜上皮細(xì)胞。羊膜來源的間充質(zhì)干細(xì)胞不僅具有典型的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志,而且保留了一些胚胎干細(xì)胞的OCT-4,SOX-2和KLF4等特有干細(xì)胞標(biāo)志,可以誘導(dǎo)分化成為脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞,顯示羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞保持了較為原始的胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn),具有多向分化的潛能。誘導(dǎo)分化之前的原代羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)固有的多種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)記,體外誘導(dǎo)后羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞可分化成為β-微管蛋白Ⅲ、神經(jīng)元特異性核蛋白、酪氨酸羥化酶、膠質(zhì)纖維酸性蛋白、髓鞘堿性蛋白和巢蛋白等陽性表達(dá)的多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞。結(jié)果表明人羊膜來源的間充質(zhì)干細(xì)胞所保留的多向分化潛能和有效分化成為多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞的特性。
【作者單位】： 中健醫(yī)療集團(tuán)干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)研究所;密蘇里大學(xué)堪薩斯分校醫(yī)學(xué)院;
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞作為一類特殊的成體干細(xì)胞,具有可塑性強(qiáng),免疫原性低,來源充分,容易培養(yǎng)擴(kuò)增和無倫理爭議限制等顯著優(yōu)點(diǎn)。因此,羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞在組織工程和細(xì)胞治療等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價值,也引起了越來越多的關(guān)注。以往,間充質(zhì)干細(xì)胞中研究較多的是骨髓

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本文編號：1186696