本文關鍵詞：MicroRNA-338-3p真核表達載體的構建及其對胃癌細胞SGC-7901增殖的影響

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【摘要】：目的構建microR-338-3p(miR-338-3p)過表達載體并探究其對人胃癌SGC-7901細胞系體外增殖的影響。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表達載體為基礎,經(jīng)EcoRⅠ和HindⅢ雙酶切和純化后與人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸進行連接,轉化至E.Coli Top10后,經(jīng)過DNA測序、BLAST檢測及驗證;將構建成功的載體瞬時轉染入SGC-7901細胞系中,應用Real-time PCR檢測miR-338-3p的表達水平,利用MTT法檢測細胞增殖的改變。結果測序驗證成功構建了miR-338-3p的真核表達載體;瞬時轉染SGC-7901細胞后miR-338-3p表達水平有顯著增加,能夠抑制SGC-7901細胞的體外增殖。結論成功構建了miR-338-3p的真核表達載體,獲得了瞬時表達miR-338-3p的人胃癌SGC-7901細胞系,初步證實miR-338-3p過表達可抑制腫瘤細胞的增殖。
【作者單位】： 西安交通大學醫(yī)學院遺傳學與分子生物學系;西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院肝膽外科;西安交通大學醫(yī)學院心血管研究中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81171398) 陜西省科技攻關項目重大科技專項(No.2010ZDKG-50)~~
【分類號】：R346
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA)是一類進化上高度保守的單鏈非編碼RNA小分子,是LEE等[1]于1993年在秀麗小桿線蟲的研究中發(fā)現(xiàn)的,其長度約為21~25nt,廣泛存在于真核生物中,大部分由基因的內(nèi)含子部位剪切產(chǎn)生。目前的研究表明,miR-NA分子通過兩種[2-3]不同機制調(diào)節(jié)蛋白的表達,當miRNA

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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10 徐t，

本文編號：1159362