本文關(guān)鍵詞：MicroRNA-338-3p真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖的影響

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【摘要】：目的構(gòu)建microR-338-3p(miR-338-3p)過(guò)表達(dá)載體并探究其對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞系體外增殖的影響。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表達(dá)載體為基礎(chǔ),經(jīng)EcoRⅠ和HindⅢ雙酶切和純化后與人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸進(jìn)行連接,轉(zhuǎn)化至E.Coli Top10后,經(jīng)過(guò)DNA測(cè)序、BLAST檢測(cè)及驗(yàn)證;將構(gòu)建成功的載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染入SGC-7901細(xì)胞系中,應(yīng)用Real-time PCR檢測(cè)miR-338-3p的表達(dá)水平,利用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖的改變。結(jié)果測(cè)序驗(yàn)證成功構(gòu)建了miR-338-3p的真核表達(dá)載體;瞬時(shí)轉(zhuǎn)染SGC-7901細(xì)胞后miR-338-3p表達(dá)水平有顯著增加,能夠抑制SGC-7901細(xì)胞的體外增殖。結(jié)論成功構(gòu)建了miR-338-3p的真核表達(dá)載體,獲得了瞬時(shí)表達(dá)miR-338-3p的人胃癌SGC-7901細(xì)胞系,初步證實(shí)miR-338-3p過(guò)表達(dá)可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)與分子生物學(xué)系;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院肝膽外科;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院心血管研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81171398) 陜西省科技攻關(guān)項(xiàng)目重大科技專(zhuān)項(xiàng)(No.2010ZDKG-50)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R346
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA)是一類(lèi)進(jìn)化上高度保守的單鏈非編碼RNA小分子,是LEE等[1]于1993年在秀麗小桿線蟲(chóng)的研究中發(fā)現(xiàn)的,其長(zhǎng)度約為21~25nt,廣泛存在于真核生物中,大部分由基因的內(nèi)含子部位剪切產(chǎn)生。目前的研究表明,miR-NA分子通過(guò)兩種[2-3]不同機(jī)制調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá),當(dāng)miRNA

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 Patrick-Denis St-Coeur;Mohamed Touaibia;Miroslava Cuperlovic-Culf;Pier Jr Morin;;Leveraging Metabolomics to Assess the Next Generation of Temozolomide-based Therapeutic Approaches for Glioblastomas[J];Genomics, Proteomics & Bioinformatics;2013年04期

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5 Wenwen Jia;Wen Chen;Jiuhong Kang;;The Functions of MicroRNAs and Long Non-coding RNAs in Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

6 林松;范磊;邵增務(wù);;微RNA調(diào)控自噬研究進(jìn)展[J];國(guó)際骨科學(xué)雜志;2013年05期

7 張世芳;魏彩虹;陸健;張小寧;周鑫磊;張淑珍;王光凱;曹家雪;趙福平;張莉;杜立新;;深度測(cè)序鑒定綿羊microRNA轉(zhuǎn)錄組[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2013年09期

8 葉辛;張蕾;石磊;谷明莉;張薇薇;張建榮;秦琴;錢(qián)寶華;鄧安梅;;免疫性血小板減少性紫癜患者單個(gè)核細(xì)胞中microRNA-30a表達(dá)增高及其意義[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年24期

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10 徐t，

本文編號(hào)：1159362